酶型（70页）教学课件.pptVIP

第九章 酶型;教学要求;第九章 酶型;LDH1;乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱;第一节 概 述;一、同工酶及多态性同工酶的概念;二、同工酶的分类及命名 ;1.复基因座位同工酶（multiple gene loci）;2.复等位基因同工酶（multiple allele）;9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。*** 10、低头要有勇气，抬头要有低气。**** 11、人总是珍惜为得到。***** 12、人乱于心，不宽余请。**** 13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。***** 14、抱最大的希望，作最大的努力。**** 15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。。***** 16、业余生活要有意义，不要越轨。*** 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。****;3.遗传变异体同工酶（genetic variants）;（二）命名;按酶促反应的性质进行分类;同工酶分类编号;2021/7/9;三、同工酶的分型方法;（二）凝胶介质上酶区带的显现和鉴定; 1.直接底物显色法：在酶的作用下，无色的底物被酶的催化反应转变成有色产物。如ACP。 2.荧光染色法：在酶的催化下，非荧光底物生成高度荧光的产物（正荧光 染色）或使荧光底物转化成非荧光产物（负荧光染色）。如EsD。;3.电子转移染料染色法：通过酶的作用，使特定底物转化成相应产物，并使辅酶NAD和NADP还原为NADH和NADPH，同时提供电子给脱氢反应的受体染料噻唑蓝（MTT）。在催化剂吩嗪甲酯硫酸盐（PMS）的存在下，噻唑蓝（MTT）被还原 成暗紫色的不溶性甲月替，使酶区带显色。 如PGM1。;（三）DNA分型技术;四、在物证鉴定中应用的多态性同工酶应具备的条件;常用的多态性同工酶;第一节 磷 酸 葡 萄 糖 变 位 酶 (PGM);一、 PGM生物化学性质与生物学功能 ;PGM1普通电泳;2021/7/9;二、PGM1等位基因结构、命名及表现型;1. PGM1等位基因及表现型;PGM1 等位基因单个碱基替换的序列分析结果;(4) 4个共显性等位基因PGM1*1+、PGM1*1-、PGM1*2+、 PGM1*2-。 现在统一命名： PGM1*1A、PGM1*1B、PGM1*2A、 PGM1*2B。 (5)表现型：PGM11+、PGM11-、PGM12+、PGM12-、PGM11+2+、 PGM11-2-、PGM11-2+、PGM11+2-、PGM11+1-、PGM12+2-。; 2.应用pH5-7梯度范围的聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦技术，PGM1 10种亚型图谱;（6）PGM1的稀有表现型;三、群体遗传学 ;部分群体PGM 1 亚型基因频率分布 ;五、PGM1分型方??? ;2. PGM1的电泳分型和酶谱显示;2021/7/9;六、PGM1的DNA-RFLP分型 ;2021/7/9;2021/7/9;第三节 酯 酶 D （Esterase EsD）;EsD分型示意图 酶谱技术;二、 EsD等位基因结构、表型;2021/7/9;5.EsD的凝胶电泳谱型有3条主要谱带，EsD 1-1型由近负极测的1带和中间位置的 2带组成，EsD 2-2型由2带和靠近正极测的3带组成；杂合的EsD 2-1型则同时具有3条带。 1、2、3带中以 1带的活性最高。;三、群体遗传学 ;2021/7/9;2021/7/9;四、分型方法 ;第四节 红细胞酸性磷酸酶（EAP）;3.ACP分类;二、等位基因结构与命名;3. EAP*B 的 表达产物快带酶蛋白多，而EAP*C的表达产物慢带酶蛋白更多，根据谱带酶活性强弱区分EAP*B与EAP*C。;EAP*D、 EAP*E、EAP*F、EAP*G、EAP*R、EAP*Tic-1及EAP*0 等。;二、EAP表型 ;1. 有明显的种族差异； 2. 各群体中EAP*B的频率都明显高于 EAP*A，其中黑人 EAP*B 的基因频率高达 0.9 以上，黄种人 EAP*B 基因频率介于黑人和白人之间； 3. 稀有基因EAP*C多见于在白种人，在中国人中极为罕见。中国 各人群中一般只能检出 A 型、B 型和 BA 型三种常见的 EAP 表型，其中 B 型的检 出率最高，BA型次之，A型最少。;2021/7/9;五、分型方法 ;2. EAP电泳分型和酶显谱反应 ;第五节 其他酶型－－黄递酶型;一、人精液中的黄递酶(DIA*3 );二、DIA3等位基因及表型;三、DIA3群体遗传学;四、DIA3分型方法;精斑DIA3电泳（PAGE）分型 ;2. 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦;2021/7/9;总结;2021/7/9;Thank you!;9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决