第五章水体污染的毒性试验方法.pptxVIP

水体污染的毒性试验 毒性试验：在适当控制的条件下，把受试生物放在不同浓度的已知或未知读物内，观察记录生物的各种反应。1.急性毒性试验：测定一种毒物在不同浓度时， 24h、48h、96h小时期间的相对致死性。LC50：某毒物在限定时间内使50%的受试生物个体死亡的浓度2.慢性毒性试验：水生生物长时间暴露在低浓度毒物下所产生的可观察的生物效应。生长情况（体长和体重）存活时间测试项目幼体产生数量孵化过程畸变的类型和百分比藻类和原生动物：几小时---几天试验时间小无脊椎动物：几星期大型无脊椎动物和鱼类：几个月—几年3.生物积累试验：生物积累：指某些毒物的浓度在生物组织内可积累到比周围水体的毒物浓度高出许多倍。生物浓缩：生物直接从水中摄取毒物生物积累生物放大：生物通过食物连摄取毒物例如：藻类 蚤 鱼生物积累的试验方法：（1）用浓缩因子测定生物浓缩BCF=平衡时的组织浓度/水中浓度生物半衰期：生物组织内毒物的浓度下降到它的一半所需的时间。（2）用放射性同位素标记法测定生物放大项目八 鱼类急性毒性试验一、试验方法（1）静水式试验（2）更新式静水试验（换水试验） （3）流水式试验（4）现场试验项目八 鱼类急性毒性试验二、试验鱼选择、收集和驯养 1.试验鱼的选择 （1）当地水体中生活的种类；（2）对污染物比较敏感；（3）能在实验条件下饲养，来源丰富，个体 健康。鲤鱼、鲫鱼、金鱼2. 实验鱼的大小和数目要求：同批、同种、同龄大小一致，在7厘米以下（金鱼3厘米）数目：每浓度组7-10尾2—3升水/g鱼1升水/g鱼3. 实验鱼的驯养驯养用水与试验用水要一致驯养7天暂养12天鱼的死亡率不能超过10%三、试验条件1.试验容器和容积容器：玻璃大小按2—3升水/g 鱼容器高度：30—35cm试验液的深度应尽可能保持一致，且不能小于15cm例如：直径25—35cm，高30—50cm的圆玻璃缸长31cm，宽24cm，高35cm的标本缸容积30升以上的大白瓷桶2. DO：不能低于4mg/L3. 水温：21～25℃ 4.光照: 12—16h5. 试验用水:未污染的自然的河水或湖水，需过滤去悬浮物，或用标准稀释水 。如用自来水，要暴气。水的硬度: 19～250mg/L (以CaCO3计) ； pH：6.0—8.5四、试验步骤1. 预备试验(1) 确定正式试验的浓度范围；目的:（2）初步观察鱼的中毒表现和选择观 察指标；（3）检验规定的试验条件是否合适。浓度范围要大些，如1000、100、10、1、0.lmg/L 5尾/浓度48－96h找出最高的全存活浓度和最低的全死亡浓度2. 试验浓度的选择根据预备试验选择出的浓度范围，中间按等比级数或等对数间距插入3—5个中间浓度。浓度的单位：mg/L、百分比每个浓度做3个平行CKCK死亡率小于10%时，实验才被承认。3. 试验液的配制方法母液丙酮、吐温溶剂CK:助溶剂含量应为试验组使用助溶剂的最高浓度，且不得超过 100mg/L或0.1mL/L CK1.03.25.67.510.04. 正式试验 低 高试验开始后的3h、6h观察记录中毒症状在24h、48h、72h和96h记录死亡鱼数5. 极限试验 可以进行浓度为100mg/L的极限试验。如极限试验结果表明LC50100mg/L。可直接给出试验结果及评价：LC50100mg/L，属于低毒。 五、数据处理与报告 1. LC50计算对数浓度（1）直线内插法废水百分率浓度（对数尺度）106543224h死亡率LC50＝5.2%96h死亡率LC50＝4.4%10 20 30 40 50 60 70 80 90 100试验鱼死亡百分数（1）直线内插法（2）概率单位目测法a. 将浓度换算成对数浓度，死亡率换算成概率单位，死亡率为100%和0时不列入计算b. 依据上述资料绘制点图，纵轴为概率单位，横轴为浓度对数c. 顺着各点的分布趋势用直尺作出一条最接近各点的直线d. 从纵轴概率单位为“5”处引一条水平线与直线相交，再从交点做垂线与横轴相交，即可LC50的对数值，此值的反对数就是LC50(3)直线回归法 x--浓度的对数;y--死亡率转换成的概率单位 y＝a+bx K--浓度的组数（死亡率为0和100%的浓度不计在内） y=－1.6901+10.5607x50%死亡率的概率单位y=5,代入上式得：x＝0.6335 LC50＝4.30 96h LC50（mg/L）1 1～10 10～100100 毒性分级 极高毒