实验1大肠杆菌的培养和分离.pptVIP

实验1： 大肠杆菌的培养和分离;微生物包括哪五类：;大肠杆菌（E.coli）;细菌的代谢类型 ;大肠杆菌;芽孢;一、基础知识：;液体培养基：;固体培养基：菌落，菌苔;半固体培养基：;选择培养基;天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。 优点：营养成分丰富，培养效果好 缺点：来源受限;成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染;;血清中含有： ①多种蛋白质（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等） ②多种金属离子； ③激素； ④促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。 ⑤各种生长因子 ⑥转移蛋白 ⑦不明成分;培养基的用途;不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方; ;比较消毒与灭菌;高压蒸汽灭菌 （湿热灭菌） 洒精灯灼烧灭菌 干热灭菌;实验1大肠杆菌的培养和分离;1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 ……;请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。 如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手;（一）制备LB培养基（通用的细菌培养基）; ①分装：注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，因此在将培养基转移到三角瓶或试管中时必须用__________。 ②加塞：试管用塑料盖或________；三角瓶口用_______或_________封口,再用_________或报纸封口。 ③包扎：用________或报纸;3）加热排气： ; 倒平板：待培养基冷却至_____ ℃时，将每只培养皿倒入_________ml未凝固的固体培养基，置于_____位置上，轻轻晃动使其均匀铺满平皿底部，待凝，使之形成平面。_______备用。 制斜面：将未凝固的固体培养 基的试管____放，冷却待凝使即 成为斜面。;思考题： A、操作过程中避免带入杂菌的方法有哪些？ 1、灭菌后的培养基、器具置于超净台上，并打 开超净台的紫外灯和过滤风，灭菌30分钟。 2、用镊子夹出洒精棉球擦拭桌面和实验者双手。 3、整个操作在酒精灯火焰旁进行 4、打开后或加塞前试管口、三角瓶口灼烧灭菌。;思??题;（二）液体培养基接种培养;（三）平板划线分离法;实验1大肠杆菌的培养和分离; 平板划线的操作方法 交叉划线法 连续划线法 ; 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？;3.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？;（四）稀释涂布平板法;10g土样;（五）斜面接种及菌种保存;菌种的保存;思考题？;例1．关微生物营养物质的叙述中，正确的 A.是碳源的物质不可能同时是氮源 C.除水以外的无机物只提供无机盐 ;超净工作台;实验一 大肠杆菌的培养和分离