【年会报告】XXXX生物教育年会报告（基因工程与细胞工程）.pptxVIP

2010年省生物教学学会年会报告 基因工程和细胞工程 福建师范大学生命科学学院 肖义军; 生物材料;获取目的基因;获取目的基因;基因文库(gene library)概念; 基因组文库(Genomic library);基因组文库;cDNA文库 (cDNA library) ;; 构建基因文库的基本程序;基因组DNA文库;基因组文库的类型;高等生物的基因组DNA十分复杂,单个基因在基因组或某个特定发育阶段或特定组织中所占比例很小。因此，要想从庞大的基因组中分离某个特定的未知基因非常困难，因此先把???料DNA分成若干易于处理的片段，然后确定目标序列在哪一片段，再进一步从该片段寻找目标序列，事情就变得容易了。; 从基因文库中筛选目的基因;探针;核酸杂交（菌落原位杂交法）;对应的菌斑或噬菌斑位置不变，可以直接找出阳性菌落。;免疫筛选法（一）;免疫沉淀检测法;PCR法获取目的基因;PCR法获取目的基因优点;化学合成制备目的基因;获取目的基因的方法;目的基因检测与鉴定;分子杂交的方法;;Southern杂交(检测目的基因是否插入到受体细胞基因组中）;放射自显影; 提取分离受体细胞的mRNA,将mRNA分子从电泳凝胶转移到硝酸纤维素滤膜或其他化学修饰的活性滤纸上，进行核酸杂交的一种实验方法。 ;Northern杂交的过程;Southern杂交和Northern杂交过程示意图 ; Western杂交（检测目的基因是否翻译成蛋白质）;Western杂交过程;;Western杂交结果图;常见载体容量;（二）细胞工程;细胞融合（cell fusion)，又称体细胞杂交，是指两个或更多个相同或不同细胞通过膜融合，形成单个细胞的过程。;细胞融合的常用方法;一、灭活病毒法;;二、聚乙二醇（PEG）法;PEG诱导融合的特点：其优点是融合成本低，不需特殊设备；融合子异核率较高；融合过程不受物种限制。其缺点是操作过程繁琐，PEG可能对细胞有毒害。?;三、电融合法;;融合细胞的筛选 ;基于酶缺陷型细胞和药物抗性所建立的杂种筛选 基于营养缺陷型细胞所建立的杂种筛选 由温度敏感型细胞组成的杂种细胞的筛选 具有所需性状杂种细胞的筛选; 杂交瘤技术与单克隆抗体;抗体;抗体结构 ;抗体的结构图;抗体结构;;抗体多样性的遗传学基础 ;抗原决定簇;;单克隆抗体;多克隆抗体; 单克隆抗体技术的核心是用骨髓瘤细胞与经特定抗原免疫刺激的B淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能象骨髓瘤细胞那样在体外无限增殖，又具有B淋巴细胞产生特异性抗体的能力。因此，单克隆抗体技术又称为杂交瘤技术。;;致敏B淋巴细胞的准备 ;;细胞内DNA的合成途径;;HAT选择培养基;在HAT选择培养基中;阳性细胞的筛选;杂交瘤细胞的克隆培养 ;;;单克隆抗体的大量制备;单克隆抗体的纯化;单克隆抗体的应用;2. 作为生物治疗的导向武器;治疗用脂质体;3.检验医学诊断试剂 ;4. 作为研究抗原的探针;5. 作为免疫抑制剂;谢谢！;9、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。8月-218月-21Sunday, August 8, 2021 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。01:44:1701:44:1701:448/8/2021 1:44:17 AM 11、越是没有本领的就越加自命不凡。8月-2101:44:1701:44Aug-2108-Aug-21 12、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。01:44:1701:44:1701:44Sunday, August 8, 2021 13、知人者智，自知者明。胜人者有力，自胜者强。8月-218月-2101:44:1701:44:17August 8, 2021 14、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。08 八月 20211:44:17 上午01:44:178月-21 15、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。。八月 211:44 上午8月-2101:44August 8, 2021 16、业余生活要有意义，不要越轨。2021/8/8 1:44:1701:44:1708 August 2021 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。1:44:17 上午1:44 上午01:44:178月-21