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细菌计数方法 细菌计数 1 、计数器测定法: 即用血细胞计数器进行计数。取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内 ,用显微镜观察计数。 由于计数室的容积就是一定的 (O 、1mm3), 因而根据计数器刻度内的细 菌数 ,可计算样品中的含菌数。本法简便易行 ,可立即得出结果。本法不仅适于细菌计数 ,也适用于酵母菌及霉菌孢子计数。 、电子计数器计数法 : 电子计数器的工作原理就是测定小孔中液体的电阻变化 ,小孔仅能通过一个细胞 ,当一个细胞 通过这个小孔时 ,电阻明显增加 ,形成一个脉冲 ,自动记录在电子记录装置上。 该法测定结果较准确 ,但它只识别颗粒大小 ,而不能区分就是否为细菌。 因此 ,要求菌悬液中不 含任何碎片。 、活细胞计数法 常用的有平板菌落计数法 ,就是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。取一定容 量的菌悬液 ,作一系列的倍比稀释 ,然后将定量的稀释液进行平板培养 ,根据培养出的菌落数 , 可算出培养物中的活菌数。此法灵敏度高 ,就是一种检测污染活菌数的方法 ,也就是目前国际上许多国家所采用的方法。 使用该法应注意 :①一般选取菌落数在 30 ～ 300 之间的平板进行计数 ,过多或过少均不准确 ;②为了防止菌落蔓延 ,影响计数 ,可在培养基中加入 O.001 ％ 2,3,5 一氯化三苯基四氮唑 (TTC); ③本法限用于形成菌落的微生物。 广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验 ,就是最常用的活菌计数法。4 、比浊法 比浊法就是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。 细菌悬浮液的浓度在一定范围内与 透光度成反比 ,与光密度成正比 ,所以 ,可用光电比色计测定菌液 ,用光密度 (OD 值) 表示样品菌 液浓度。 此法简便快捷 ,但只能检测含有大量细菌的悬浮液 ,得出相对的细菌数目 ,对颜色太深的样品 , 不能用此法测定。 5 、测定细胞重量法 此法分为湿重法与干重法。湿重法系单位体积培养物经离心后将湿菌体进行称重 ;干重法系单位体积培养物经离心后 ,以清水洗净放人干燥器加热烘干 ,使之失去水分然后称重。 此法适于菌体浓度较高的样品 ,就是测定丝状真菌生长量的一种常用方法。6 、测定细胞总氮量或总碳量 氮、碳就是细胞的主要成分 ,含量较稳定 ,测定氮、碳的含量可以推知细胞的质量。此法适于细胞浓度较高的样品。 7 、颜色改变单位法 (colour change unit, 简称 CCU) 这种方法通常用于很小 ,用一般的比浊法无法计数的微生物 ,比如支原体等 ,因为支原体的液体培养物就是完全透明的 ,呈现为清亮透明红色 ,因此无法用比浊法来计数 ,由于支原体固体培养很困难 ,用 cfu 法也不容易计数 ,因此需要用特殊的计数方法 ,即 CCU 法。它就是以微生物在培养基中的代谢活力为指标 ,来计数微生物的相对含量的 ,下面以解脲脲原体为例单介绍其操作 :,简 取 12 只无菌试管 ,每一管装 1、 8ml 解脲脲原体培养基。 在第一管加入 0 、2ml 待测解脲脲原体菌液 ,充分混匀 ,从中吸取 0 、2ml 加入第二管 ,依次类推 ,10 倍梯度稀释 ,一直到最末一管 于 37 度培养 ,以培养基颜色改变的最末一管作为待测菌液的 CCU,也就就是支原体的最大 卫生管理制度 1 总则 1.1 为了加强公司的环境卫生管理，创造一个整洁、文明、温馨的购物、办公环境，根据《公共场所卫生管理条例》的要求，特制定本制度。 1.2 集团公司的卫生管理部门设在企管部，并负责将集团公司的卫生区域详细划分到各部室，各分公司所辖区域卫生由分公司客服部负责划分，确保无遗漏。 2 卫生标准 2.1 室内卫生标准 2.1.1 2.1.2 2.1.3 2.1.4 2.1.5 2.1.6 2.1.7 2.1.8 2.1.9 2.1.10 2.1.11 2.2 室外卫生标准 2.2.1 2.2.2 2.2.3 3 清理程序 3.1 室内和门前院落等区域卫生： 每天营业前提前 10 分钟把所管辖区域内卫生清理完毕，营业期间随时保洁。下班后 5-10 分钟清理桌面及卫生区域。 3.2 绿化区卫生：每周彻底清理一遍，随时保持清洁无垃圾。 4 管理考核 4.1 实行百分制考核，每月一次（四个分公司由客服部分别考核、集团职能部室由企管部统一考核）。不符合卫生标准的，超市内每处扣 0.5 分，超市外每处扣 1 分。 4.2 集团坚持定期检查和不定期抽查的方式监督各分公司、部门的卫生工作。每周五为卫生检查日，集团检查结果考核至各分公司，各分公司客服部的检查结果考核至各部门。