大蒜多糖对人体肝癌BEL7402的体外抑制作用（论文范文）.docVIP

大蒜多糖对人体肝癌BEL7402的体外抑制作用（论文范文） 文档信息 主题： 关于“论文”中“医学论文”的参考范文。 属性： F-00BPSH，doc格式，正文4048字。质优实惠，欢迎下载！ 适用： 作为医学论文、药学写作的参考文献，解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容摘取等相关工作。 作者： lunwenchina 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 搞要 1 关键字：大蒜多糖; 肝癌细胞Bel-7402 ; 细胞凋亡 2 1 材料与仪器 2 2 方法 3 3 结果 4 4 讨论 5 【参考文献】 6 论文原创声明（模板） 7 论文致谢（模板） 8 正文 大蒜多糖对人体肝癌BEL7402的体外抑制作用（论文范文） 搞要 摘要：目的探讨大蒜多糖(GarlicPolysaccharide，GP)对人肝癌BEL-7402细胞的增殖抑制效果和诱导凋亡的作用。方法以10，30，100，300μg/ml的GP作用于体外培养的BEL-7402细胞，并作用不同时间，通过MTT法检测GP对细胞生长的抑制作用，倒置显微镜下观察细胞的形态变化，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果MTT实验显示GP可抑制BEL-7402细胞的生长，呈时间及浓度依赖性,显微镜下可观察到细胞肿胀、破裂、呈坏死状,流式细胞仪可检测到BEL-7402细胞凋亡率明显增加。结论GP能通过诱导细胞凋亡的方式有效地抑制人肝癌BEL-7402细胞的生长 关键字：大蒜多糖; 肝癌细胞Bel-7402 ; 细胞凋亡 细胞凋亡作为生物细胞对内外信号刺激的一种反应，在正常细胞的发育过程中调控细胞的死亡过程，凋亡的产生可能由不同生理、生化或有毒物质诱发[1]。有研究认为肿瘤的发生是细胞凋亡被抑制的结果[2]。5-氟尿嘧啶(5-FU)作为当前临床上抗肿瘤药得到广泛应用，人们已认识到该药物可致免疫抑制作用和肝损害等毒副作用[3]，大蒜多糖(Garlic Polysaccharide，GP)是从大蒜球根中提取的活性成分，具有抗氧化、清除氧自由基、保护心肌、防止心肌纤维化作用[4，5]，但对诱导细胞凋亡的作用还见报道。本文通过研究 GP 对人肝癌细胞 BEL-7402 细胞生长的抑制以及诱导细胞凋亡的作用，旨在探讨 GP 体外对肝癌的作用效果，为其进一步应用于临床治疗肝癌提供有力的实验依据。 1 材料与仪器 药物GP的提取分离：新鲜大蒜去皮 → 碾成蒜泥 → 无水乙醇浸泡过夜→ 尼龙布过滤 → 沉淀用无水乙醇浸泡1 h → 尼龙布过滤 → 沉淀用无水乙醇浸泡24 h → 尼龙布过滤 → 沉淀(即脱脂蒜泥)用双蒸水溶解 → 沸水浴8 h → 冷却 → 尼龙布过滤 → 滤液中滴加4～5倍无水乙醇 → 静置72 h → 抽滤 → 滤液68 ℃水浴约8 h蒸出乙醇 → 滤液中滴加3 ～ 4倍丙酮 → 静置6 h → 抽滤 →得大蒜多糖组分C粗品。粗品Sevage法去蛋白后于55 ℃红外线干燥得淡黄色粉末即GP[6] 细胞人肝癌细胞BEL-7402购自武汉大学医学院细胞中心。 试剂RPMI-1640干粉(美国Gibco公司产品);胎牛血清(杭州四季青公司);四甲基偶氮唑盐 ( MTT，sigma公司);二甲基亚砜(江苏强盛化工有限公司);注射用生理盐水(湖北拓朋药业有限公司);5-氟尿嘧啶(天津金耀氨基酸有限公司，批号：090271) 仪器ALE-200型电子分析天平(湘仪天平仪器厂);YXJ-1型离心机(SIGMA); CO2 培养箱(HERAEUS);酶标仪(MAGELLAN);CKX41型倒置显微镜(OLYMPUS);流式细胞仪(FACS cadibur) 2 方法 BEL-7402细胞培养人肝癌细胞BEL-7402常规培养于含10%热灭活的胎牛血清、100 U/ml青霉素、100U/ml链霉素的RPMI-1640培养液中，37℃，5%CO2及饱和湿度条件下培养，取对数生长期细胞进行各项实验。 MTT法测定取对数生长期的细胞消化，配制成1×105 个 / ml细胞悬液， 接种于96孔培养板中，每板300 μl。设4个浓度的药物组，一个阳性对照组和空白对照组，每组12复孔。药物组加不同浓度的GP使其终浓度分别为10，30，100，300 μg/ml ;阳性对照组加入5-氟尿嘧啶，使其终浓度为10 μg/ml。空白对照组为不加药物的培养基。置37 ℃，5 % CO2培养箱中分别培养24，48，72 h后每孔加MTT 20 μl，继续培养4 h后取出，吸弃培养基，每孔加150 μl DMSO，于酶标仪490 nm处测定其OD值，以正常组OD值为对照，计算各孔细胞抑制率(﹪)=(1-各孔OD值/正常组OD