白纹伊蚊拟除虫菊酯类杀虫剂抗性机理研究.docVIP

白纹伊蚊拟除虫菊酯类杀虫剂抗性机理研究 白纹伊蚊拟除虫菊酯类杀虫剂抗性机理研究 PAGE / NUMPAGES 白纹伊蚊拟除虫菊酯类杀虫剂抗性机理研究 白纹伊蚊拟除虫菊酯类杀虫剂抗性机理研究 研究背景 : 蚊虫可流传疟疾、乙脑、黄热病、登革热、基孔肯雅热、寨卡病 毒病等多种疾病 , 近期 , 巴西等南美洲国家发生寨卡病毒暴发疫情 , 惹起全世界宽泛 关注。白纹伊蚊产于东亚 , 白日觅食 , 比埃及伊蚊有更高的叮咬频次 , 是目前最具 侵袭性的蚊种 , 过去 30 年中 , 这一物种已经从本地起源地亚洲东南部延伸扩散至 全世界除了南极洲之外的六个洲近 50 个国家和地域 , 是目前生界多个国家和地 区最重要的登革媒介之一 , 也是中国登革流传的主要媒介 , 自 1978 年广东佛山首 次暴发登革热以来 , 广东省已发生过大小不等的登革热流行 , 最近几年来更常有暴发 流行 ,2002 年 5 月, 广东省出现登革热的暴发流行 , 仅广州市就发生 1422 例;2014 年我国广东省及东南亚地域多个国家发生登革热疫情 , 在近 20 年是最高的 , 依据 广东省登革疫情通告 , 截止 2014 年 12 月 15 日 , 广东省整年累计确诊登革病例 45171 例, 此中广州 37354 例, 死亡 6 例。 全世界有超出三分之一的人口生活在登革易感地区 , 每年有超出四十亿的人口 感染登革病毒。有文件报导白纹伊蚊关于寨卡病毒也有携带和流传能力。 固然 2015 年 11 月首只登革疫苗已经在巴西、墨西哥和菲律宾开始使用 , 但 迄今成效其实不理想 , 且 9 岁以下小孩不在合用范围以内 , 预防登革热最卓有成效 的方法是从控制传染源和流传媒介方面着手 , 蚊媒种群的控制是迄今登革热预防 的独一有效门路 , 拟除虫菊酯类杀虫剂 , 因为其高效、低毒、经济等有长处 , 不单 在高密度白纹伊蚊的公共地区 , 也是农业领域应用最为广发的杀虫剂 , 为世界卫 生组织 (WHO)主要介绍的成蚊杀虫剂。拟除虫菊酯类杀虫剂在公共卫生的媒介控 制和在农业病虫害控制领域作用明显 , 但其对蚊虫种群造成了巨大的选择性压力 , 抗性白纹伊蚊集体在印度、中国、巴基斯坦、马来西亚、泰国和马达加斯加等地 报导。 只管蚊类的杀虫剂抗药性增添迅猛 , 但因为缺少其余卓有成效、成本效益高 的代替举措 , 化学类杀虫剂仍旧是当今蚊媒控制的最主要手段。蚊媒杀虫剂抗药 性认识包含两个方面 :1) 影响杀虫剂联合位点亲和性的靶标位点突变 ( 靶标抗 性 );2) 杀虫剂抵达目标位点前的代谢解毒作用 ( 代谢抗性 ) 。 针对第一种机理 , 电压门控钠离子通道 Voltage-Gated Sodium Channelgene(VGSC),是拟除虫菊酯的作用靶标。 在超越不一样蚊种的各样抗性研究 文件中 , 仅有一小部分氨基酸位点发生 VGSC基因非同义突变 , 可经过基因扩增的 方法进行抗性诊疗如冈比亚按蚊 An.gambia 的 L1014F 位点突变。 而第二种机理 , 解毒酶类如酯酶、 P450单加氧酶、谷胱甘肽 S 转移酶 (GST) 饰演了重要角色。除上述两种抗性体制外 , 其余机理如外皮增厚、消化道改变以 防备或减少杀虫剂浸透、汲取 , 均对杀虫剂抗性的发展起到必定作用。 新的基因组学方法将为杀虫剂抗药性机理研究带来崭新的整体理解 , 此中一 种高性价比方法为转录组测序法 (RNA-seq), 已经应用于蚊媒的研究 , 进行了不吉 按蚊 和埃及伊蚊 特定阶段特定组织的 denovo 转录组装置 和表达谱剖析 , 冈比亚按蚊 An.gambia 的喂血前后表达谱剖析等等 , 还没有见该技 术应用于白纹伊蚊抗性有关研究。 RNA扰乱经过人为引入与内源靶标基因拥有相 同序列的双链 RNA,是目前关于基因功能性研究最卓有成效的方法之一 , 为功能 基因组学的研究供给了更为快捷方便的工具。 SNP称为单核苷酸多态性 (single nucleotide polymorphism,SNP), 作为一 种新式的分子遗传标志 , 因为需要大批单个样本 , 成本较高 , 统计学上要求增添 SNP的密度以提升攻击学正确性。近十几年经过生物信息学 , 从分子水平理解蛋 白质与底物之间的互相作用 , 是差异于传统方法经过分子生物学手段经过表达对 应蛋白既而研究蛋白特征的来新兴研究工具。 详细对照核酸序列 , 依据 SNP惹起的氨基酸突变 , 经过同源建模的方法 , 能够 对不一样表型的 SNP位点与蛋白构造的影响成立明显性关系 , 是针对 SNP进行研究 的新方法。实验目的 : 本研究以目前全世界散布最为宽泛的“亚洲虎纹”——白纹 伊蚊为研究对象 , 经