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PAGE PAGE 3 生物选修3知识汇编 一、基因工程 1.基本工具： (1)工具酶。①限制性核酸内切酶(又称限制酶)：切割目的基因和载体(断开磷酸二酯键)。 ②DNA连接酶：缝合DNA片段断口处外侧链(形成磷酸二酯键)。 常用载体：质粒、 噬菌体的衍生物、动植物病毒。 (2)载体应具备的条件。 ①能在宿主细胞内稳定存在并复制：便于目的基因的表达。 ②有一至多个限制酶切割位点：便于外源DNA分子的插入。 ③具有标记基因：鉴定与选择重组DNA分子。 2.基本操作程序： (1)目的基因的获取。 ①基因文库获取,②PCR技术扩增,③化学方法直接人工合成。 (2)基因表达载体的构建。 ①启动子：启动转录。 ②目的基因：控制需要的特定性状。 ③终止子：终止转录。 ④标记基因：筛选重组细胞。 (3)将目的基因导入受体细胞。 ①导入植物细胞：最常用方法是农杆菌转化法,另外还有花粉管通道法和基因枪法。 ②导入动物细胞：最常用方法是显微注射。 ③导入微生物细胞：常用Ca2+处理使受体细胞处于感受态。 (4)目的基因的检测与鉴定。 3.应用： (1)植物基因工程。 ①抗虫、抗病、抗逆转基因植物; ②利用转基因改良植物的品质。 (2)动物基因工程。 ①提高动物生长速度;②改善畜产品的品质;③用转基因动物生产药物; ④用转基因动物作器官移植的供体。 (3)基因工程药物。 (4)基因治疗。 ①体外基因治疗;②体内基因治疗。 二、植物组织培养与动物细胞培养的比较 植物组织培养 动物细胞培养 原理 细胞的全能性 细胞增殖 培养基的物理性质 固体 液体(合成培养基) 培养基 的成分 水、无机盐、维生素、蔗糖、氨基酸、琼脂等 糖、氨基酸、促生长 因子、无机盐、微量元素、血清等 过程 脱分化、再分化 原代培养传代培养 条件 无菌、无毒,植物激素如生长素、细胞分裂素 ①用胰蛋白酶制备单细胞悬液;②培养液中加入抗生素防止杂菌感染;通入一定浓度CO2维持pH 应用 ①微型繁殖 ②作物脱毒 ③生产人工种子 ④单倍体育种 ⑤突变体的利用 ⑥细胞产物的工厂化生产 ①蛋白质生物制品的生产 ②皮肤移植材料的培育 ③检测有毒物质 ④生理、病理、药理学研究 三、细胞工程： （一）、植物细胞工程： (1)原理：细胞的全能性。 (2)植物组织培养技术： (3)、植物体细胞杂交技术： （二）、动物细胞工程： 1、动物细胞培养： 2、动物体细胞核移植： （1）原理：动物细胞核具有全能性。 3、单克隆抗体制备： （2）制备过程： 4、动物细胞融合： （1）诱导动物细胞融合的方法：物理法-离心、振动、电击等。化学法：聚乙二醇；生物法：灭活病毒。 四、胚胎工程： （一）体内受精和早期胚胎发育 1. 精子的发生： 场所：睾丸的曲细精管 时间：初情期到生殖机能衰退过程 2、卵细胞的发生： 场所：输卵管、卵巢 时间：性别分化后（胚胎时期） (1)受精条件。 精子必须经过①获能过程,卵母细胞必须发育至减二中期才能参与受精作用。 (2)受精过程。 ②过程中防止多精入卵的两道屏障分别是透明带反应和 卵黄膜封闭反应。 (3)早期胚胎发育过程。 卵裂期整个胚胎的体积基本不变,每个细胞的体积减小;开始出现细胞分化的时期是囊胚期。 2.胚胎干细胞： (1)来源：早期胚胎或原始性腺。 (2)特点：体积小、细胞核大、核仁明显,具有发育的全能性。 (3)体外培养：饲养层。（作用：促进细胞生长、增殖，防止细胞分化。） （4）应用：治疗某些顽症;定向培育人造组织器官;研究体外细胞分化和细胞凋亡的机理。 3、胚胎发育： （二）体外受精和早期胚胎发育： 卵母细胞的采集和培养：促性腺激素、超声波探测仪、内窥镜等。 精子的采集：假阴道法、手握法、电刺激法。获能：培养法、化学诱导法。 5.胚胎移植： (1)胚胎移植的理论基础。 ①移入：经同期发情处理后,同种供受体生殖器官的生理变化相同。 ②收集：早期胚胎形成后,未与母体子宫建立组织上的联系,而是处于游离状态。 ③存活：受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应。 ④发育：供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系,且不影响供体胚胎的遗传特性。 (2)胚胎移植的实质和意义。 ①实质：早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。 ②意义：充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能。 (3)胚胎移植操作流程。 6、胚胎分割： （1）材料：发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。 （2）注意事项：将内细胞团均等分割。 二、生物技术的安全性与伦理问题 1.转基因生物的安全性问题： (1)食物安全：滞后效应、、营养成分的改变(实质性 等同)。 (2)生物安全：对生物多样性的影响。 (3)环境安全：对生态系统稳定性的影响。 2.生物技术引发的伦理问题： (1)克