新项目方法能力验证报告(水中总大肠菌群的测定(B) 多管发酵法《水和废水监测分析方法》).pdf

XXXX有限公司 新项目方法验证能力验证报告 水中总大肠菌群的测定（B） 多管发酵法《水和废水监测分 项目名称： 析方法》（第四版） (B) 国家环境保护总局(2002年)第五 篇第二章五（一） 负责人 ： 审核人 ： 日 期： 报告编号： 第 1 页 共 5 页 水中总大肠菌群的测定（B） 多管发酵法《水和废水监测分析方法》（第 四版） (B) 国家环境保护总局(2002年)第五篇第二章五（一） 方法验证能力验证报告 1、方法依据及适用范围 本报告依据：《水和废水监测分析方法》（第四版） 国家环境保护总 局(2002 年) 制定。 本标准规定了多管发酵法测定水和废水中总大肠菌群。 2、定义 多管发酵是根据大肠菌群细菌能发酵乳糖、产酸产气以及具备革兰氏 染色阴性、无芽孢、呈杆状等有关特性，通过三个步骤进行检验，以求得 水样中的总大肠菌群数。 多管发酵法是以最可能数（most probable number ）简称MPN 来表示试 验结果的。实际上它是根据统计学理论，估计水体中的大肠杆菌密度和卫 生质量的一种方法。如果从理论上考虑，并且进行大量的重复检定，可以 发现这种估计有大于实际数字的倾向。不过只要每一稀释度试管重复数目 增加，这种差异便会减少，对于细菌含量的估计值，大部分取决于那些既 显示阳性的稀释度。因此在实验设计上，水样检验所要求重复的数日，要 根据所要求数据的准确度而定。 3、主要仪器、设备及试剂 3.1 培养基与试剂 3.1.1 乳糖蛋白胨培养液 蛋白胨 10g 报告编号： 第 2 页 共 5 页 牛肉浸膏 3g 乳糖 5g 氯化钠 5g 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1mL 蒸馏水 1000mL 将蛋白胨、牛肉浸膏、乳糖、氯化钠加热溶解于1000mL蒸馏水中调节 pH为7.2～7.4，再加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL，充分混匀，分装于含 有倒置的小玻璃管的试管中，于高压蒸汽灭菌器中，在115℃灭菌20min， 贮存于暗处备用。 次培养基适用于检验=大肠菌群时作发酵试验之用。根据实际需要，也 可按上述配方比例（除蒸馏水外）配成二倍、三倍 或五倍浓缩的乳糖蛋白 胨培养液，制法同上。 3.1.2品红亚硫酸钠培养基： 蛋白胨 10g 乳糖 10g 磷酸氢二钾 3.5g 琼脂 20～30g 蒸馏水 1000mL 无水亚硫酸钠 5g左右 5%碱性品红乙醇溶液 20mL ①贮备培养基：先将琼脂加至900mL蒸馏水