基于细胞膜展示冠状病毒免疫原以诱导中和抗体的方法发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 113151184 A (43)申请公布日 2021.07.23 (21)申请号 202110654496.4 A61P 31/14 (2006.01) (22)申请日 2021.06.11 (66)本国优先权数据 202010544616.0 2020.06.15 CN (71)申请人 上海市公共卫生临床中心 地址 201508 上海市金山区漕廊公路2901 号科研楼308室 (72)发明人 徐建青　张晓燕　何香川　丁龙飞　 曹康丽　 (74)专利代理机构 上海专利商标事务所有限公 司 31100 代理人 杨昀 (51)Int.Cl. C12N 5/10 (2006.01) 权利要求书1页 说明书19页 A61K 39/215 (2006.01) 序列表11页 附图8页 (54)发明名称 基于细胞膜展示冠状病毒免疫原以诱导中 和抗体的方法 (57)摘要 本申请公开了一种基于细胞膜展示冠状病 毒免疫原以诱导中和抗体的方法。具体而言，本 公开中提供了一种在其细胞膜表面展示新型冠 状病毒SARS‑CoV‑2刺突蛋白S的细胞，包含所述 细胞的针对新型冠状病毒SARS‑CoV‑2的疫苗或 疫苗组合，所述细胞在制备用于预防或治疗新型 冠状病毒SARS‑CoV‑2的疫苗中的应用及其制备 方法。本公开的细胞和疫苗能够在体内高效活化 B细胞，诱导中和抗体应答，在预防和降低新冠病 毒感染中有广泛的应用前景。 A 4 8 1 1 5 1 3 1 1 N C CN 113151184 A 权　利　要　求　书 1/1 页 1.一种在其细胞膜表面展示新型冠状病毒SARS‑CoV‑2刺突蛋白S的细胞。 2.如权利要求1所述的细胞，其中，所述刺突蛋白S的氨基酸序列如SEQ  ID NO:2所示； 或者， 所述刺突蛋白S包含在融合肽中，例如与之融合的部分选自：病毒或宿主来源的蛋白， 转铁蛋白(Fn)、HIV p24、囊膜病毒的茎部，如流感HA2、艾滋病毒的gp41、抗体Fc段、GM‑CSF、 IL‑21、CD40L或CD40抗体。 3.如权利要求1所述的细胞，其中，所述细胞包含具有刺突蛋白S编码序列的载体，例 如，转入了具有SEQ  ID NO:1所示核苷酸分子的载体。 4.如权利要求1所述的细胞，其中，所述细胞为哺乳动物细胞或昆虫细胞，如K562、 A549、HEK293、HeLa、CHO、NS0、SP2/0、PER.C6、Vero、RD、BHK、HT  1080、A549、Cos‑7、ARPE‑19、 MRC‑5细胞、High Five、Sf9、Se301、SeIZD2109、SeUCR1、Sf9、Sf900+、Sf21、BTI‑TN‑5B1‑4、 MG‑1、Tn368、HzAm1、BM‑N、Ha2302、Hz2E5、Ao38，优选K562细胞、A549细胞、HEK293细胞，优选 6 所述细胞具有展示所述刺突蛋白S的完整膜结构，优选每1 ×10 个所述细胞提供约0.3～ 0.6微克(如0.47微克)的刺突蛋白S。 5.如权利要求1所述的细胞，其中，所述细胞是已灭活的细胞，例如采用物理灭活如X‑ 射