一种检测新冠病毒的试剂盒及其检测方法和应用发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112816712 A (43)申请公布日 2021.05.18 (21)申请号 202110353115.9 (22)申请日 2021.04.01 (71)申请人 王思亓 地址 110001 辽宁省沈阳市和平区北二马 路69号 (72)发明人 王思亓　周子均　刘雨彤　杨松奇　 (74)专利代理机构 沈阳亚泰专利商标代理有限 公司 21107 代理人 马维骏 (51)Int.Cl. G01N 33/68 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01) G01N 33/558 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01) G01N 33/532 (2006.01) 权利要求书2页 说明书4页 附图1页 (54)发明名称 一种检测新冠病毒的试剂盒及其检测方法 和应用 (57)摘要 本发明属于生物医药领域，具体涉及采用 Pt‑Pd合金纳米颗粒标记的免疫层析法制备的新 型冠状病毒中和抗体检测试剂盒及其检测方法 和应用。一种检测新冠病毒的试剂盒，含有新冠 病毒SARS‑CoV‑2中和抗体Pt‑Pd合金纳米颗粒试 纸条。所述新冠病毒SARS‑CoV‑2中和抗体Pt‑Pd 合金纳米颗粒试纸条的制备方法为用合金纳米 颗粒标记新冠病毒SARS‑CoV‑2抗原作为捕获抗 体纳米标记物，再将纯化的A型表达抗原及其抗 体包被在纤维素膜上，分别作为检测线T线和质 控线C线，经条件优化，建立新冠病毒中和抗体 A Pt‑Pd合金纳米颗粒试纸条。该试剂盒操作和携 2 带方便，具备较高灵敏度，相比胶体金灵敏度可 1 7 6 提高24倍，同时具备可操作性与重现性，可用于 1 8 2 新型冠状病毒引起的肺炎的诊断。 1 1 N C CN 112816712 A 权　利　要　求　书 1/2页 1.一种检测新冠病毒的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有新冠病毒SARS‑CoV‑2中 和抗体 Pt‑Pd 合金纳米颗粒试纸条。 2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述新冠病毒SARS‑CoV‑2中和抗体 Pt‑Pd  合金纳米颗粒试纸条的制备方法为用合金纳米颗粒标记新冠病毒SARS‑CoV‑2抗原作为捕 获抗体纳米标记物，再将纯化的A  型表达抗原及其抗体包被在纤维素膜上，分别作为检测 线T 线和质控线C 线，经条件优化，建立新冠病毒中和抗体 Pt‑Pd 合金纳米颗粒试纸条。 3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述的Pt‑Pd合金纳米颗粒是通过抗坏血 酸AA还原 K PtCl 和Na PdCl 制备的。 2 4 2 4 4.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述的纤维素膜是硝酸纤维素膜。 5.一种新冠病毒的检测方法，其特征在于，具体包括以下步骤： 步骤1、制备新冠病毒SARS‑CoV‑2中和抗体 Pt‑Pd 合金纳米颗粒试纸条； 步骤2、样品定性检测：向试纸卡的样品孔中加入 35 μL 待检血清，之后再加入等体积 稀释液，反应  10 min 后向NC 膜反应区加入 TMB 显色剂，随即进行结果判定； 步骤3、样品定量检测：判定值CUT‑OFF的确定，分别取已知抗体效价为  1:64、1:128、1: 256 和  1:512  的阳性血清各  1 份，步骤1制备的试纸条进行检测，每份血清重复检测  10  次，用金标免疫分析仪扫描读取信号 T/C  比值，将 T/C  比值的平均值作为 CUT‑OFF 值， 并建立标准曲线；