新型冠状病毒N蛋白单克隆抗体的制备发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 113150136 A (43)申请公布日 2021.07.23 (21)申请号 202110482613.3 (22)申请日 2021.04.30 (71)申请人 杭州贤至生物科技有限公司 地址 310000 浙江省杭州市余杭区东湖街 道东湖北路488-1号16幢401室 (72)发明人 曹丹琴　李小平　项美华　朱伟　 余卫　余铭恩　 (74)专利代理机构 杭州橙知果专利代理事务所 (特殊普通合伙) 33261 代理人 杜放 (51)Int.Cl. C07K 16/10 (2006.01) C12N 15/13 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01) 权利要求书2页 说明书20页 序列表7页 (54)发明名称 新型冠状病毒N蛋白单克隆抗体的制备 (57)摘要 本发明属于生物技术领域。本发明提供了一 种重组蛋白，该重组蛋白氨基酸序列由新型冠状 病毒N蛋白两个优势表位重复串联组成。本发明 还涉及用该重组蛋白免疫小鼠建立噬菌体库，经 淘选筛选得到对应新型冠状病毒N蛋白单链抗体 scfv序列，将得到的scfv序列构建成完整鼠IgG1 抗体序列表达载体，通过瞬转HEK293F细胞表达 单克隆抗体，纯化单克隆抗体，通过胶体金正交 实验确定两对最优单克隆抗体配对组合。 A 6 3 1 0 5 1 3 1 1 N C CN 113150136 A 权　利　要　求　书 1/2 页 1.新型冠状病毒N蛋白特异性单链抗体scfv‑3A2，包括轻链和重链，其特征在于： 所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ  ID NO.1所示； 所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ  ID NO.2所示。 2.新型冠状病毒N蛋白特异性单链抗体scfv‑4B9，包括轻链和重链，其特征在于： 所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ  ID NO.3所示； 所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ  ID NO.4所示。 3.新型冠状病毒N蛋白特异性单链抗体scfv‑2C6，包括轻链和重链，其特征在于： 所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ  ID NO.5所示； 所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ  ID NO.6所示。 4.新型冠状病毒N蛋白特异性单链抗体scfv‑6D8，包括轻链和重链，其特征在于： 所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ  ID NO.7所示； 所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ  ID NO.8所示。 5.一种编码权利要求1所述的新型冠状病毒N蛋白特异性单链抗体scfv‑3A2的基因，其 特征在于： 编码轻链可变区的核苷酸序列如SEQ  ID NO.9所示； 编码重链可变区的核苷酸序列如SEQ  ID NO.10所示。 6.一种编码权利要求2所述的新型冠状病毒N蛋白特异性单链抗体scfv‑4B9的基因，其 特征在于： 编码轻链可变区的核苷酸序列如SEQ  ID NO.11所示； 编码重链可变区的核苷酸序列如SEQ  ID NO.12所示。 7.一种编码权利要求1所述的新型冠状病毒N蛋白特异性单链抗体scfv‑2C6的基因，其 特征在于： 编码轻链可变区的核苷酸序列如SEQ  ID NO.13所示； 编码重链可变区的核苷酸序列如SEQ  ID NO.14所示。