新型冠状病毒S蛋白及其亚单位疫苗发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 113185613 A (43)申请公布日 2021.07.30 (21)申请号 202110395117.4 A61P 31/14 (2006.01) (22)申请日 2021.04.13 (71)申请人 武汉大学 地址 430072 湖北省武汉市武昌区珞珈山 武汉大学 (72)发明人 徐可　蓝柯　 (74)专利代理机构 武汉科皓知识产权代理事务 所(特殊普通合伙) 42222 代理人 常海涛 (51)Int.Cl. C07K 19/00 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) A61K 39/215 (2006.01) 权利要求书1页 说明书11页 序列表36页 附图4页 (54)发明名称 新型冠状病毒S蛋白及其亚单位疫苗 (57)摘要 本发明提供了一种新型冠状病毒S蛋白及其 亚单位疫苗，所述新型冠状病毒S蛋白的S1/S2两 个亚基之间的furin裂解位点682‑RRAR‑685替换 为柔性的蛋白linker，所述linker为以甘氨酸G 和丝氨酸S构成的GSAS、GS组合、(GGGS) 或者 n (GGGGS) 或者(G) ，n为≥1的整数。所述新型冠 n n 状病毒亚单位疫苗包含所述的重组S蛋白以及药 学上接受的佐剂。本发明应用获取的具有生物活 性的三聚体构象的S蛋白，制备成三聚体亚单位 疫苗，免疫小鼠后能够诱导小鼠产生针对SARS‑ CoV‑2的具有免疫保护作用的中和抗体，对免疫 小鼠进行新型冠状病毒的致死性攻毒感染后，可 A 以提供100％的保护效率。 3 1 6 5 8 1 3 1 1 N C CN 113185613 A 权　利　要　求　书 1/1 页 1.一种新型冠状病毒S蛋白，其特征在于，所述新型冠状病毒S蛋白的S1/S2两个亚基之 间的furin裂解位点682‑RRAR‑685替换为柔性的蛋白linker，所述linker为以甘氨酸G和丝 氨酸S构成的GSAS、GS组合、(GGGS) 或者(GGGGS) 或者(G) ，其中，n为≥1的整数。 n n n 2.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒S蛋白，其特征在于，所述新型冠状病毒S蛋 白具有如下修饰1‑修饰4中的至少一种： 修饰1、所述新型冠状病毒S蛋白的原始信号肽替换为tPA信号肽、CD5信号肽和IgG信号 肽中的一种； 修饰2、所述新型冠状病毒S蛋白跨膜区替换为SEQ  ID NO：24所示的T4噬菌体fibritin 三聚体基序或SEQ  ID NO:25GCN4多聚体形成基序； 修饰3、所述新型冠状病毒S蛋白的C端结构域删除SEQ  ID NO：26所示跨膜结构域； 修饰4、所述新型冠状病毒S蛋白在氨基酸位置817‑987处具有一个或多个氨基酸残基 突变为脯氨酸的突变，所述突变包括K986P和/或V987P取代。 3.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒S蛋白，其特征在于，所述新型冠状病毒S蛋 白的核苷酸序列如SEQ  ID NO：8所示或者SEQ  ID NO：1