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DNS法测定复原糖 DNS法测定复原糖 DNS法测定复原糖 DNS 法测复原糖方法 一 原理 DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下，二硝基水杨酸〔 DNS〕与复原糖 发生 氧化复原反响，生成 3- 氨基 -5- 硝基水杨酸，该产物在煮沸条件下显棕红色， 540nm处有吸取，且在必然浓度范围内颜色深浅与复原糖含量成比率关系的原理，用 比色法 测定复原糖含量的。 二 试剂及方法 2.1 试剂 1 mg/ml 的葡萄糖溶液 3,5 －二硝基水杨酸 用 400mL 蒸馏水溶解 6.3g3 ， 5—二硝基水杨酸，渐渐参加 21g 氢氧化钠，再参加 182g 四水合酒石酸钾钠、 苯酚、 无水亚硫酸钠，温水浴 (不高出 48 ℃ )，不断搅 拌，直至溶液清明透明。用蒸馏水定容至 1000mL ，保存在棕色瓶中，与二氧化碳间隔， 静置 5 ～7 天后使用，储藏期为 6 个月。 2.2 葡萄糖标曲的绘制 表 1 葡萄糖标曲的绘制方法 试剂 试管 0 1 2 3 4 5 葡萄糖标准液 (ml) 0 蒸馏水 (ml) 0 3,5-二硝基水杨酸 (ml) 糖含量〔 mg〕 0 混杂均匀，开水浴 5min，冷却后参加 4mL 蒸馏水，混匀，在 540nm 下测 OD 值 2.3 发酵液样品测定 将发酵液稀释必然倍数后， 0.5 ml  取 3 只比色管标号 5min  1,2,3，参加稀释和的发酵液 4 ml OD540  0.5 ml ，参加  DNS 表 2 样品的测定方法 管号 0 1 2 复原糖待测样品 〔 mL〕 蒸馏水 〔mL 〕 DNS 试剂 〔 mL〕 蒸馏水 〔mL 〕 4 4 4 A 540 nm 计算所得复原糖含量 〔mg〕 三 结果计算 3.1 标曲 3.2 样品的复原糖含量 计算获取的复原糖量〔 mg〕 复原糖含量〔 g / L〕 稀释倍数加人样品的体积〔〕