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试验一:使用高倍显微镜观看几种细胞一、试验目的:1、学会如何使用显微镜观看细胞;2、明白细胞的结构;3、学会制作暂时装片;二、试验材料:三、试验用具:5X、
试验一:使用高倍显微镜观看几种细胞
一、试验目的:
1、学会如何使用显微镜观看细胞;
2、明白细胞的结构;
3、学会制作暂时装片;
二、试验材料:
三、试验用具:
5X、 10X、40X)
四、方法步骤:
(试验材料可换)松针、动物血液、动物神经细胞永久装片
载玻片、盖玻片、蒸馏水、滴管、镊子、土豆、刀片、显微镜(物镜
1、制作松针的暂时切片:
(1)取洁净的载玻片一个平置于试验台上,用滴管在载玻片中心滴一滴蒸馏水;
(2)将土豆切成条状(截面约:
0.5X0.5cm) 取两条,将一根松针夹在两个土豆条之间,用
刀片削成尽量薄的薄片,削时,手腕不动,靠大臂带动小臂移动刀片;切片数次;从中选取
较薄的切片,置于载玻片的水滴上;
(3)从一侧轻轻盖上盖玻片,不要产愤怒泡;用吸水纸轻轻吸去盖玻片四周的水滴,即完成暂时切片的制作;
2、观看切片:
(1)取出显微镜,置于试验台上靠左的位置,打开光源;
(2)
将上步制作好的切片置于显微镜的载物台上,调整载物台位置,使盖玻片对准光源;
(3)使用 5X 物镜观看切片,使松针切片在视野中心,换成
构;
(4)换成 40X 物镜观看,留意细胞及细胞内物质结构,画图;
10X 物镜, 观看松针叶面横切结
3、 动物血液暂时装片的制作及观看(除了不用切片,其他类似)
4、 动物神经细胞永久装片的观看;
五、考点提示:
1、松针的叶面结构是什么样的?
2、动物细胞的结构是什么样的?与植物细胞又什么不同?
3、显微镜的物镜倍数愈大,视野的亮度如何?物体的大小如何?
4、如何调剂焦距?
5、如何才能使切片尽量的薄?切片的厚薄对显微镜下观看的成效有什么影响;
试验二:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
一、试验目的:
尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、
脂肪和蛋白质, 阐明试验原理—颜色反应,
识记和区
分用于可溶性仍原糖、
脂肪、 蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色,
初步把握鉴定上述化合
NaOH溶液和 CuSO4溶液的使用方法;
物的基本方法,学会描述试验现象,把握
二、试验原理:
某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应;
1、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖;前三种糖的
分子内都含有游离的具仍原性的半缩醛羟基,因此叫做
仍原糖 ;蔗糖分子内没有,为非
仍原糖;试验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中可溶性仍原糖,而不能鉴定可溶
性非仍原糖;
- 1 -
Cu2O可溶性仍原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的沉淀;如:—葡萄糖 + 2Cu + 4OH2+葡萄糖酸 + Cu 2
Cu2O
可溶性仍原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的
沉淀;如:
—
葡萄糖 + 2Cu + 4OH
2+
葡萄糖酸 + Cu 2 O↓(砖红色)
+ H 2 O
加热
2+
即 Cu 被仍原成 Cu2 O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸;
用斐林试剂鉴定仍原糖时,溶液变化过程为:
浅蓝色 → 棕色 → 砖红色沉淀
淀粉遇碘变 蓝色(直链) 或紫(红)色(支链)
;
2、脂肪和类脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)统称为脂类;它是构成人体组织的正常成分,不
溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中;在化学组成上,脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质;脂类的主要功能是氧化供能;
脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内;
在病理检验中,脂类染色法最常用以证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别;脂类染
色使用最广泛的染料是苏丹染料,最常用的有苏丹Ⅲ,苏丹Ⅳ,苏丹黑及油红
肪被染色,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而出现染料的颜色;经争论认为组织中脂质在液态或半液态时,对苏丹染料着色成效最好;依据这一原理,适当提高温度(
-60 ℃)对组织切片染色成效是有好处的;
O等;脂
37℃
脂类染色,用冰冻或石蜡切片,以水溶性封固剂封固,如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等;
脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色或橙红色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色),胆脂素呈淡红色,脂肪酸不着色,细胞核呈蓝色;
3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应;(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性
Cu2+作用,产生紫色反应;)
NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的
- 2 -
三、试验材料:1、做可溶性仍原性糖鉴定试验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨;(由于组织的颜色较浅,易于观看;)经试验比较,颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜;2、做脂肪的鉴定试验;应选富含脂肪的种子,
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