铜绿山抗铜固氮微生物的筛选与鉴定.docxVIP

TOC \o 1-5 \h \z 摘要 1 \o Current Document ABSTRACT 1 1 前言 2 \o Current Document 1.1固氮的主要形式 2 L1.1人工固氮 2 1.1.2天然固氮（高能固氮） 3 1.1.3生物固氮 4 \o Current Document 1.2氮循环 5 \o Current Document 1.3生物固氮的应用及发展前景 6 1.3.1生物肥料 6 1.3.2农业应用 8 1.3.2研究前景 9 \o Current Document 1.4木课题研究的目的、意义 10 \o Current Document 2材料和方法 11 \o Current Document 材料 11 土样及菌种 11 培养基 11 \o Current Document 2.2方法 12 土壤稀释分离 12 培养基制备 12 涂布平板 12 2.2.4筛选菌种 12 2.2.5 分离方法 13 2.2.6微生物纯化 13 2.2.7 固氮能力的检测 13 2.2.8固氮菌抗铜性能研究 14 2.2.9 PCR菌种鉴定 15 \o Current Document 3 实验结果与分析 16 \o Current Document 3.1菌种分离纯化结果 16 \o Current Document 3.2 菌种抗铜性能检测 22 菌种选择 22 接种 23 \o Current Document 3.4 16srDNA 检测 25 3.4.1 PCR 测序 25 \o Current Document 4 结论与讨论 26 \o Current Document 参考文献 27 实验分别从青箱根际土、篦麻根际土、杨树非根际土、白牙根际土、杂草根 下土、高铜土等18个土壤样品中分离筛选得到7个能在无氮培养基上良好生长 的菌株，从中挑出12株菌落形态特殊的菌株作为实验菌株。抗铜实验中有2株 菌种表现出了优良的抗铜能力。最终实验对6株菌进行了 16srDNA测序，得出 关键词：固氮微生物；固氮；抗铜 ABSTRACT Experiments get seven strains to cultivate in non-nitrogen grow well on the substrate, which were isolated from 18 soil samples in seeds rhizosphere soil, rhizosphere soil ricin, non-rhizosphcrc soil of poplar, white root rhizosphere soil, weed root soil, high copper soil and other, and picked 12 strains with special colony morphology as the experimental strains. Anti-copper experiment has two strains exhibited excellent resistance to copper capacity. Finally experiment were scqucnccd with 16srDNA on six strains, The result is that Keywords: Nitrogen fixing microorganisms; nitrogen fixation; Copper resistance 氮索是组成生命物质最重要的元索之一，大气屮的氮，必须经过以生物同氮 为主的固氮作用，才可能被植物吸收利用。在白然界小只有某些微生物能直接地 将大气中的氮气通过固氮酶的作用还原成氨。它们所进行的生物固氮作用是土壤 中氮素的最主要來源，也是固氮微生物参与口然界中氮素循环过程的主要环节， 同氮菌主要包括自生同氮菌、共生同氮菌和联合間氮菌。 目询固氮菌应用的主要方式是固氮菌肥料的施用。固氮肥料是利用固氮微生 物将大气屮的分子态氮气转化为农作物能利用的氨，进而为其提供合成蛋白质所 必需的氮素营养。同氮菌肥料也是如今最理想、最具发展前途的肥料Z-O 一方面，固氮菌能为植物充分提供氮素营养，一定程度上抑制了病虫害，从 而减少了化肥和农药的使用，减少了他们对自然环境的污染。 另一方面，研究表明在重金属污染较严重的土壤里，有较多种类的根瘤菌可 以生长。这方面的研究很多，但对根瘤菌抗重金属的研究还不是很成熟，仍然有 待选出一批抗重金属强的固氮细菌及其共生体系，此外也可以利用分子生物学的 手段构建一种抗重金属的工程根瘤菌，