蛋白质沉淀反应.pptVIP

* * 蛋白质沉淀反应 第一页，共10页。 一、实验目的 掌握几种使蛋白质沉淀的方法； 掌握蛋白质可逆沉淀与不可逆沉淀的区别； 理解蛋白质变性和沉淀的关系。 第二页，共10页。 二、原理 蛋白质是亲水胶体，正常状态下，蛋白质分子表面具有水化膜和电荷层，能保持其胶体溶液的稳定性，在一定因素 的影响下，蛋白质会失去电荷和脱水沉淀。 蛋白质的变性与沉淀之间没有必然联系 第三页，共10页。 蛋白质沉淀反应 （一）蛋白质的盐析作用 （二）乙醇沉淀蛋白质 （三）重金属盐类沉淀蛋白质 （四）生物碱试剂沉淀蛋白质 第四页，共10页。 （一）蛋白质的盐析作用 加盐类如硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等可以破坏蛋白 质胶体周围的水膜，同时又中和了蛋白质分子的电 荷，因此使蛋白质产生沉淀，这种加盐使蛋白质沉 淀析出的现象称盐析。 盐溶现象为低盐浓度可使蛋白质的溶解度增加，实 验时要加足够量的盐。 蛋白质的盐析作用是可逆过程，用盐析方法沉淀蛋 白质时，较少引起蛋白质变性，经透析或用水稀释 时又可溶解。 第五页，共10页。 （二）乙醇沉淀蛋白质 有机溶剂如酒精、丙酮等可使蛋白质产生沉淀，这 是由于这些有机溶剂和水有较强的作用，破坏了蛋 白质分子周围的水膜，因此发生沉淀作用。若及时 将蛋白质沉淀与丙酮或乙醇分离，蛋白质沉淀则可 重新溶解于水中。 第六页，共10页。 （三）重金属盐类沉淀蛋白质 溶液pH