蛋白质的共价结构 (2).pptVIP

（二）、末端氨基酸残基的鉴定 、 末端分析 2 C C末端AA α氨基醇 水解肽链，鉴定α氨基醇 ② 还原法 硼氢化锂 第六十二页，共110页。 肽链外切酶:从多肽链C-端逐个水解 根据不同反应时间释放出的AA种类和数量 蛋白质C-末端残基顺序。 四种羧肽酶：A,B,C和Y； A和B(胰脏)、C(柑桔叶)、Y(面包酵母) ∽A:除Pro/Arg/Lys/外所有C-末端AA残基 ∽B:只水解Arg和Lys为C-末端残基的肽键 ∽Y：可作用于任何一个C-末端残基的肽键 ③羧肽酶法 （二）、末端氨基酸残基的鉴定 、 末端分析 2 C 第六十三页，共110页。 （三）、二硫键的断裂 盐酸胍/尿素解离多肽链间的非共价力。 应用过甲酸氧化法或巯基还原法拆分多肽链间的二硫键。 第六十四页，共110页。 1、酸水解 常用6M盐酸或4M硫酸 优点：水解产物不消旋 缺点：Trp被沸酸完全破坏 含羟基Ser、Thr、Tyr部分分解 Asn、Gln酰胺基被水解 （四）、氨基酸组成的分析 第六十五页，共110页。 2、碱水解 一般用5M氢氧化钠 缺点：许多AA受到不同程度的破坏 部分水解产物发生消旋化 优点：Trp不受破坏 （四）、氨基酸组成的分析 第六十