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- 2021-10-11 发布于上海
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(病原免疫实验课件)实验三免疫标记技术;〔一〕1、酶联免疫吸附试验〔ELISA〕;〔一〕免疫标记技术
【概念或原理】: 利用荧光素、酶、胶体金、发光物质以及放射性核素等易显示物〔标记物〕连接于抗体或抗原,再去检测待测标本中的相应抗原或抗体的量或其存在与否。 优点:高度的敏感性和特异性,简便、快速,可作定性、定量或定位测定。
【分类】
荧光免疫技术
酶免疫技术→ELISA〔双抗体夹心法 〕
放射免疫技术
金免疫技术→斑点免疫层析试验
化学发光免疫技术等
;;*;tubercle bacillus with fluorescence;*; 酶免疫组化技术:组织〔或细胞〕中抗原定位
酶免疫测定(如ELISA):测液体标本中抗原或抗体
ELISA (酶联免疫吸附试验,enzyme-linked immunosorbent assay)
sandwich ELISA to detect Ag √
indirect ELISA to detect Ab
competitive ELISA to detect Ag or Ab; 1〕抗体包被
2〕洗板
3〕加待检抗原标本
4〕洗板
5〕加酶标记抗体
6〕洗板
7〕加底物显色,测定
(measure color)
;〔一〕免疫标记技术 1、酶联免疫吸附试验 (ELISA) ------双抗体夹心法;〔一〕1、酶联免疫吸附试验〔ELISA〕;*;;〔一〕2、斑点免疫层析试验(dot gold immunochromatographic assay,DICA);*; ;*;〔一〕2、斑点免疫层析试验; 〔二〕免疫细胞功能测定
1、E花环试验
原理: T细胞外表有绵羊红细胞受体〔E受体〕(CD2),假设T细胞与绵羊红细胞共同孵育,T细胞周围吸附绵羊红细胞,为花环形成细胞,
可用来鉴定和计数T细胞 ;; ; ;rosette forming cell;rosette forming cell;rosette forming cells;rosette forming cell (electron microscope); ;〔二〕2、淋巴细胞转化试验; ; ;;转化的淋巴细胞包括以下三种细胞:
〔1〕淋巴母细胞:体积明显增大,为成熟淋巴细胞的3~4倍。核膜清晰,核染色质疏松,呈细网状。核内见明显核仁1~4。胞浆丰富,嗜碱性,有伪足样突出。胞浆内有时可见小空泡。
〔2〕过渡型淋巴细胞:具有上述淋巴母细胞的某些特征。核质疏松,可见核仁,胞浆增多,嗜碱性强。体积比小淋巴细胞大。
〔3〕核分裂相细胞:核呈有丝分裂,可见
许多对成堆或散在的染色体。; ;*;① untransformed lymphocyte, small
② transitional cell ③ typical lymphoblast ; untransformed
lymphocyte;Acute lymphocytic leukemia;Lymphoblast, 原始淋巴细胞;Lymphoblast, 原始淋巴细胞;核仁;图2〔大图〕、狗急性淋巴细胞性白血病血片,可见大量淋巴母细胞。
图3〔小图〕、外周血涂片,成熟小淋巴细胞;; ; ; ;;;;
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