医学微生物学实验脓汁和粪便标本中病原菌的检测.pptVIP

医学微生物学实验脓汁和粪便标本中病原菌的检测;自然界中微生物;医学微生物学试验综合性试验三 (P38);空气细菌学检验P38;试验方法: 自然沉降法是依据空气中细菌气溶胶粒子, 在地心引力作用下, 以垂直自然方法沉降到培养基表面; 培养以后, 计数菌落形成单位（ colony forming unit , CFU）, 了解空气污染情况。 试验步骤: 每组1块平板, 选择采样地点（试验室、宿舍、卫生间、饭堂或任选地点）, 将平板盖打开, 盖朝下放置在平板旁, 平板暴露于空气中15分钟, 然后盖上盖子, 作标识。37℃温箱培养二十四小时, 观察结果。 ★ CFU/m3 ＝ 50000N÷AT≈86N(直径7cm平板）。 N: 平板上菌落数。 A: 平板面积(平方厘米)。 T: 采样时间(分钟)。;空气的细菌学检查;手指皮肤细菌学检验P41;医务人员, 常常要与病人接触, 不管是直接接触, 还是间接接触, 都有传输病菌可能。即使病菌直接起源是患者, 不过造成病菌扩散关键路径则是气溶胶和医务人员手。所以, 常常洗手和消毒是控制医院内交叉感染关键方法。 实际上, 预防感染方法中, 最简单又十分有效方法就是洗手。据测定, 只用自来水洗手可使暂住菌总数降低40%, 用肥皂洗手可降低80%以上。 洗手？;常规洗手方法（甲和丙操作）;医学微生物学试验室标准洗手方法（乙和丁操作）;1.掌心对掌心搓擦 2.手指交错掌心对手背搓擦 3.手指交错掌心对掌心搓擦;医务人员洗手指征;;医学微生物学试验综合性试验一(P2);常见病原性球菌检验程序P47: 直接涂片、革兰染色、镜检 脓汁、痰、咽部分泌物 观察菌落性状、溶血性、色素 血琼脂平板培养 涂片染色镜检 挑取可疑菌落 生化反应 ↑ 纯培养 动物试验 药敏试验 血液、穿刺液 → 肉汤增菌培养 → 培养液涂片染色境检 常见肠道致病菌检验程序P48: 粪便 → SS琼脂、伊红美蓝平板培养 → 挑取可疑菌落 ↑ ↓ 血清学判定 血、骨髓 → 增菌培养 双糖铁培养基 染色镜检 生化反应 ;平板划线分离法: 借助于划线, 将混杂多个细菌, 在固体培养基表面分散成单个细菌, 并固定在某一点上。培养以后细菌各自分裂繁殖, 形成肉眼可见细菌集团。 ☆ 在固体培养基表面或基内, 由单个细菌在局部位置不停增值稠密群体称为单菌落。 ☆在固体培养基表面, 由多个菌落融合在一起形成细菌堆积物,称为菌苔。;平板分区划线分离法步骤（5区） 接种环烧灼灭菌, 以免污染标本。 取标本在平板表面上方密集涂布5～10mm2。 烧掉接种环上多出标本（火焰后面烤干→烧灼）。 晃动平板, 当看到平板表面象镜面有反光时候, 保持这个角度, 划线时就能看清划线痕迹, 方便控制划线。 接种环与平板呈30～40度角, 经过密集涂布部分1～3次, 使接种环重新沾上少许标本(细菌), 然后在平板表面, 以曲线形式, 作大幅度往返连续划线, 边划边退, 线段要划得长而密集, 每区划线不少于30条。 转动平板, 接种环经过第一区1次, 一样方法划第二区。如此依次划完3～5区。 接种环烧灼灭菌（火焰后面烤干→烧灼）, 以免污染环境。 将平板倒置（盖在下, 底朝上）, 37℃培养18～24h 。 ★要充足利用平板面积, 5区间隔尽可能小, 不能划破琼脂。;;平板划线分离法P8;试验分组;接种环烧灼灭菌;接种环直径3mm;;;;;37℃培养二十四小时 ;37℃培养二十四小时 ;37℃培养二十四小时 ;37℃培养二十四小时 ;安全警告;思索题;试验内容;常见器材摆放次序: 电源插座→试管架→酒精灯→污物盘。 试管架上器材: 按接种针、接种环、油性笔和打火机次序, 分别放置在试管架中间两行, 靠近电源插座一侧。 ※器材使用以后, 必需放回原处, 依次摆整齐。;酒精棉球;试验室器材 整齐有序