单克隆抗体与基因工程抗体的制备.ppt

单克隆抗体与基因工程抗体的制备; 第一节 杂交瘤技术基础原理 一、杂交瘤技术 二、阳性杂交瘤细胞克隆化培养与冻存;第三节 基因工程抗体制备 一、人源化抗体　 二、小分子抗体 三、抗体融合蛋白 四、双特异性抗体 五、噬菌体抗体库技术; 第一节 杂交瘤技术基础原理;抗体种类: 第一代抗体 多克隆抗体（polyclonal antibody) 第二代抗体 单克隆抗体（monoclonal antibody) 第三代抗体 基因工程抗体（genetic engineering antibody);B淋巴细胞:寿命短,分泌特异系性抗体 骨髓瘤细胞: 寿命长 杂交瘤细胞: 寿命长, 单克隆抗体;流 程;不产生Ig重链和轻链 HGPRT-;TK- 与提供淋巴细胞动物品系相同; 动 物: BALB/c小鼠 7～12周龄 20g～25g体重 ;细胞性抗原: （1~2）×107/只, 不加佐剂, 2~3周反复一次 可溶性抗原: 首次, 完全福氏佐剂+100微克抗原, 3~6周100~200微克抗原, 融合前3天, 加强免疫;。;。;。;。;培养液: RPM1640培养液 DMEM培养液;细胞融合剂: PEG:分子量4000 PEG是最常见细胞融合剂 作用机理: 诱导细胞膜上脂类物质结构重排, 使细胞膜易打开而有利于细胞融合 作用特点: 随机发生, 不一样厂商