第三十七课时鉴定类实验.docVIP

第三十三课时——鉴定、提取、分离实验 一、教学目标 1. 生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 2. 模拟尿糖的检测 3. 叶绿体中色素的提取和分离 二、教学重点 1. 叶绿体中色素的提取和分离 2. 模拟尿糖的检测 三、教学难点 1. 叶绿体中色素的提取和分离 2. 模拟尿糖的检测 四、教学过程 考点一 生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定（B） 一、实验原理 可溶性还原糖与 试剂发生作用，生成 色沉淀；脂肪可以被 染成 色；蛋白质与 试剂发生作用，产生 色反应。 二．实验材料 1．做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖 ，颜色为 的植物组织，如苹果、梨。（因为组织的颜色较浅，易于观察。） 2．做脂肪的鉴定实验。应选富含 的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3~4小时（也可用蓖麻种子）。 3．做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。 三、方法步骤 （一）可溶性糖的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 1. 制备组织样液。 （去皮、切块、研磨、过滤） 苹果或梨组织液必须临时制备。 因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。 2. 取1支试管，向试管内注入2mL组织样液。 3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂，振荡。 应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液 量混匀成斐林试剂； 切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。 斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu(OH)2在70~900C下分解成黑色 甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无Cu(OH)2生成。 4. 试管放在盛有 0C温水的大烧杯中，加热约2分钟，观察到溶液颜色：浅蓝色 → 棕色 → 最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯 ，试管口不朝向 。 防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤； （二）脂肪的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。 干种子要浸泡3~4小时，新花生的浸泡时间可缩短。 因为浸泡时间短，不易 ，浸泡时间过长，组织较软，切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。 在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ染色3分钟或苏丹Ⅳ染液，染色1分钟。 染色时间不宜过长。 用吸水纸吸去薄片周围染液，用 酒精洗去浮色，吸去酒精。 酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。 用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上1~2滴蒸馏水，盖上盖玻片。 滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。 低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处，可看到细胞中有染成 色或 色圆形小颗粒。 装片不宜久放。 时间一长，油滴会溶解在乙醇中。 （三）蛋白质的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 制备组织样液。 （浸泡、去皮研磨、过滤。） 黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间。 鉴定。加样液约2ml于试管中，加入 ，摇匀；再加入 3~4滴，摇匀，溶液变紫色。 A液和B液也要分开配制，储存。鉴定时先加 液后加 液。 CuSO4溶液不能多加。 先加NaOH溶液，为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入，会导致Cu2+变成Cu(OH)2沉淀，而失效。 否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。 可用蛋清代替豆浆。 蛋清要先 。 如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。 附：淀粉的检测和观察 用试管取2ml待测组织样液，向试管内滴加2滴碘液，观察颜色变化。 碘液不要滴太多 以免影响颜色观察 考点二 模拟尿糖的检测（B） 一、实验目的 学会尿糖的检测方法、检查“尿样”中是否含有葡萄糖。 二、实验原理 方法一、斐林试剂+葡萄糖 水浴 沉淀 葡萄糖葡萄糖酸+H2O 葡萄糖 葡萄糖酸+H2O2 葡萄糖氧化酶 H2O2 H2O+O 过氧化氢酶 有色化合物 无色化合物+O 三、实验步骤 方法一 （1）取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 （2）检测方法： 试剂（水浴加热）或尿糖试纸 （3）结果：（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀的是 的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。 （4）分析：因