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实验二 植物组织的水势和渗透势的测定 二、植物组织渗透势的测定 实验原理 当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态,植物细胞内的压力势为零时,细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。这种渗透势相等的溶液称为等渗溶液。该溶液的浓度称为等渗浓度。 当一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁别离现象时,细胞的等渗浓度介于刚刚引起初始质壁别离的最低浓度和尚不能引起质壁别离的最高浓度之间的溶液浓度。代入公式即可计算其渗透势。 * 实验二 植物组织的水势和渗透势的测定 二、植物组织渗透势的测定 试验方法 质壁别离法 实验目的 观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁别离的产生过程,了解其用于测定植物组织渗透势的原理与方法。 * 实验二 植物组织的水势和渗透势的测定 二、植物组织渗透势的测定 实验器材 显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、刀片、酒精灯、滤纸、滴管、移液管、小培养皿。 材料与试剂 洋葱鳞片、1mol/L蔗糖溶液。 * 实验二 植物组织的水势和渗透势的测定 二、植物组织渗透势的测定 方法步骤 1.配制0.1~0.8mol/L浓度的8个梯度的蔗糖溶液各10ml,分别盛于小培养皿中,并加上盖子。 2.从部位相近的鳞片上斯取大小相近〔约几个平方毫米〕的内表皮,从浓度高的蔗糖溶液开始,依次每隔3min投放3片内表皮到一种浓度的溶液中〔以便有充足的时间观察,并使组织在不同的溶液中处理时间一致〕,并使之完全浸没,室温下放置30min。 * 实验二 植物组织的水势和渗透势的测定 二、植物组织渗透势的测定 方法步骤 3.按浓度由高到低依次取出处理过的表皮,放在有1~2滴相应浓度蔗糖溶液的载玻片上,盖上盖玻片,在显微镜下观察质壁别离的情况〔每次镜检约100个细胞〕,并记录不同浓度溶液处理下质壁别离的程度。 4.依据不同溶液中植物细胞质壁别离的程度,确定一个引起50%的细胞角隅上出现质壁别离〔作为初始质壁别离〕的溶液浓度,或确定引起细胞质壁别离最低浓度和不引起质壁别离最高浓度的平均值,作为等渗浓度。用新的溶液和植物材料进行重复试验过程,以确保结果的准确性。 * 实验二 植物组织的水势和渗透势的测定 二、植物组织渗透势的测定 结果计算 依据所确定的等渗浓度,根据下式计算该植物组织的平均渗透势。 计算公式ψs=-iRTc 式中ψs为平均渗透势,以bbbaaar表示; i为解离系数,蔗糖是1; R为气体常数,0.083L·bbbaaar/mol·K; T为绝对温度,K〔即273℃+t,t为实验室温度〕; c为等渗溶液浓度,mol/L。 * 实验二 植物组织的水势和渗透势的测定 二、植物组织渗透势的测定 思考题 1.如何提高质壁别离法测定植物组织渗透势试验的准确性? 2.不同浓度的NaaaCl可否用于测定植物组织的渗透势? * 实验二 植物组织的水势和渗透势的测定 作业 完成试验报告 * 实验三 叶绿体色素的提取、别离及含量测定 一、叶绿体色素的提取、别离 实验原理 植物色素包含脂溶性的叶绿体色素和水溶性的细胞液色素。叶绿体色素是植物进行光合作用吸收光能的重要物质根底。叶绿体色素主要包括叶绿素aaa、叶绿素bbb、叶黄素和胡萝卜素,它们与类囊体膜蛋白结合成色素蛋白复合体而存在。 根据叶绿体色素的脂溶性特性,常用乙醇、丙酮等有机溶剂离析而从植物材料将其提取。叶绿体色素是由化学结构和相对分子质量不同的多种成分组成,依据它们在有机溶剂中的溶解性和在吸附剂上的吸附性差异,可别离出它们的各组分。 * 实验三 叶绿体色素的提取、别离及含量测定 一、叶绿体色素的提取、别离 实验目的 以植物叶片组织为材料,提取叶绿体色素;以纸层析法别离其成分。 实验器材 天平、剪刀、研钵、离心机、玻璃棒、量筒、烧杯、滤纸、小烧杯。 材料与试剂 植物叶片、丙酮、碳酸钙粉、石英砂、层析液 [按石油醚:丙酮〔25:3〕比例配置〔V/V〕]。 * 普通生物学实验 EMAIL:glaaayertop2@163 植物学局部 王建芳 Contents 1. 植物的徒手切片和植物各类组织的观察 2. 植物叶脉标本的制作 3. 叶绿体色素的提取、别离及含量测定 4. 植物种子活力的快速测定 * 实验一 植物徒手切片和植物各类组织观察 一、植物徒手切片法 实验目的 徒手切片的方法是我们从事教学、科研及生产 技术工作中常用的最简便的观察植物内部构造 的方法,这种方法不需要复杂的设备,又能随 时迅速地观察植物的生活细胞及各器官内部组 织的生活状况和天然的色彩,所以有很大的实

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