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ELISA 的标准曲线一般使用专门的曲线拟合工具，如： Curve Exert1.3
下面以 Curve Exert1.3 为例说明怎么样制作：
1 启动 “Curve Expert1.3 ”
2 X 轴输入标准品的 OD 值， Y 轴输入所对应的浓度值，如图：
2 X 轴输入标准品的 OD 值， Y 轴输入所对应的浓度值，如图：
3 ．单击 [ 运行 ] 按钮，出现如下对话框
4 ．单击 [ok] 按钮，出现如下两个对话框，关闭下面一个对话框
关闭下面一个对话框
5. 在对话框的右上角出现一些曲线的名称，从 “1开始依次点击曲线名称，在右下角会出现”
相应拟合的曲线， 。
根据拟合的曲线选取 ELISA 拟合度最佳的曲线双击，出现如下对话框：
注意：选择系数（即 “r值）最好的曲线方程来进行运算。在下面的对话框”
右上角有 “r值” ，当 “r值越接近” 1 拟合度越好
7 ．按 [Ctrl] 键 [L] 键，出现如下对话框：
8 ．输入标准的 OD 值，单击 [Calculate] 按忸，即可得到待测蛋白的实际含量。 （标本稀释了
N 倍，运算出的数值应在成以 N ）。
9. 如想得到 ELISA 拟合曲线的方程，可在步骤 6 的对话框空白处右击，选择 ” Information ”
10. 得到如下对话框：点击 “Copy ”
在你需要的位置粘贴即可得到如下数据：
Rational Function: y=(a bx)/(1 cx dx^2)
Coefficient Data:
a =
b =
c =
d =
当抗原或抗体浓度过高时，对应的 ELISA 读数不会再显著升高，这时会达到一个平台期，
同样在低浓度时也有一个平台期。 只有在适当的浓度时才会出现类似直线的曲线， 所以一般
数据都要进行多参数拟和，才能得到能更准确反映实验结果的曲线，常用的有 sigmoid 、
logistic 曲线等，一半的软件如 sigmaplot 或 origin 都有这个功能
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