(完整word版)人教版高中生物选修三知识点总结(详细).docVIP

选修3《现代生物科技专题》知识点总结 专题1 基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做 DNA 重组技术。 操作水平：DNA分子水平 原理：基因重组 优点：1.突破物种界限 2.定向改造生物的遗传特性 （一）基因工 1•“分子手术刀”一一限制性核酸内切酶（ 限制酶） （1） 来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 （2） 功能:能够 识别特定的核苷酸序列 ，并在特定的切点切割，因此具有专一性。 （3） 作用的化学键：切割 磷酸二酯键 （4） 结果：经限制酶切割产生的 DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2. “分子缝合针” 一一DNA连接酶 （1）作用：将两个具有相同粘性末端的 DNA片段连接起来，形成重组 DNA （2） 连接的化学键：磷酸 — （3） 与DNA聚合酶作用的异同： DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。 DNA 连接酶是连接两个 DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。 DNA连接酶 DNA聚合酶 不同点 连接的DNA 双链 单链 模板 不要模板 要模板 连接的对象 2个DNA片段 单个脱氧核苷酸添加到已存在的单链 DNA片段上 相同点 作用实质 形成磷酸二酯键 化学本质 蛋白质 3•“分子运输车”一一运载体 （1） 载体具备的条件：① ② 具有一至多个限制酶切点，供外源 DNA片段插入。 ③ 具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 （2） 最常用的载体是 质粒，它是一种环状DNA分子。 （3） 其它载体：噬菌体、动植物病毒 （二）基因工程的 第一步：目的基因的获取 1. 从基因文库中获取（不知道目的基因的核苷酸序列的情况下采用） 2. 人工合成。常用方法有：（1 ）反转录法（已经获得 mRNA勺情况下采用） （2）化学合成法（知道目的基因的核苷酸序列、基因比较小的情况下采用） 3. PCR技术扩增目的基因（知道目的基因两端的核苷酸序列、基因比较大的情况下采用） （1） PCR的含义：是一项在生物体外复制特定 DNA片段的核酸合成技术。 90〜95C DNA解链为单链；（高温解旋） 55〜60 C,引物与两条单链 DNA结合； 70〜75 C,热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。 第二步：基因表达载体的构建 （核心） 1. 目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 2. 组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因 （1） 启动子：是一段有特殊结构的 DNA片段，位于基因的首端，是 RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转 录 mRNA （2） 终止子：也是一段有特殊结构的 DNA片段，位于基因的尾端，使转录停止。 （3） 标记基因的作用：鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 常用的标记基因是抗生素基因。 第三步：将目的基因导入受体细胞 _ 1. 转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 2. 常用的转化方法： 将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 农杆菌转化法，其次还有 基因枪法和花粉管通道法等。 将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 显微注射技术。方法的受体细胞多是 受精卵。 将目的基因导入微生物细胞：感受态细胞法：用 Ca2+处理细胞 （使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混 合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收 DNA分子，完成转化过程） 原核生物作为受体细胞的优点： 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少 第四步：目的基因的检测和表达 1. 首先要检测转基因生物的染色体 DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交（DNA-DNA）技术。 2. 其次还要检测目的基因是否转录出 mRNA方法是采用 分子杂交（DNA-RNA）技术。 3. 最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是采用 抗原一抗体杂交 技术。 4. 有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如生物抗虫或抗病的鉴定等。 （三）基因工程的应用 基因工程的应用 1•植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。 2•动物基因工程：提高动物生长速度；改善畜产品品质；用转基因动物生产药物：如 方法是将目的基因导入哺乳动物的 受精卵中，使其发育成转基因动物。 3•基因治疗是把 正常基因导入病人的体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗的目的，这是 治疗遗传病 最有效的手段。 4. 基因诊断：又称为 DNA诊断，是采用基因检测