仪器分析选论酶免疫分析技术.pptxVIP

仪器分析选论酶免疫分析技术;2;一、均相酶免疫测定法;一、均相酶免疫测定法;二、非均相酶免疫测定法;酶联免疫吸附试验（ELISA）;方法类型及反应原理;;（1）将已知抗体包被于固相反应板上，洗涤。 （2）加待检标本,温育，洗涤。 （3）加酶标抗体，洗涤。 （4）加底物，根据颜色反应的程度进行该抗原的 定性或定量。 ;;2.双位点一步法检测抗原;; ; 如果待检标本中抗原浓度过高， 容易形成“钩状效应（hook effect）”。钩状效应严重时，可出现假阴性结果，必要时可将待检标本适当稀释后重新测定。;3.竞争法检测抗原;酶标抗原;（1）将特异性抗体包被于固相反应板上，洗涤。 （2）待测管中加待检标本和一定量酶标抗原的混合溶液，待检标本中如果含有抗原，则与酶标抗原竞争固结合相抗体，使酶标抗原与固相载体的结合量减少。对照管中只加酶标抗原，温育，洗涤。 （3）加底物显色。对照管中颜色深，待测管颜色越淡，表示标本中抗原含量越多。; ;（二）检测抗体的方法; ; ;2.双抗原夹心法;;4.加酶作用的底物 不显色;3.竞争法检测抗体;（1）竞争法检测HBcAb： ①将HBcAg包被于固相反应板上，洗涤。 ②加入待检标本和酶标特异性抗体，温育，洗涤。 ③加入底物，温育，形成有色产物，用酶标比色仪测定结果。显色深浅与待检标本中相应抗体含量成反比。;;3.加酶作用的底物