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肿瘤动物模型的构建——白血病篇 导读 白血病 （Leukemia ）是一种常见的恶性血液疾病， 俗称血癌。据统计，白血病是儿童恶性肿瘤的头号原因，在 儿童及 35 岁以下成人中发病率位居第一 [1] 。同时也是十大 恶性肿瘤之一。目前，白血病具体的发病原因至今尚未研究 透彻，因此建立合适的白血病动物模型，对于白血病发病机 制及药物研发具有重要意义。 本期为大家综述了白血病的基本情况及小鼠模型的分类、建 立方法和应用。 第一章： 白血病基本常识白血病是常见液体瘤 白血病是常见的液体瘤， 与结肠癌、 肝癌等实体瘤不同的是， 它是造血干细胞的异常分化和过度增殖导致，因此肿瘤细胞 会遍布全身，会侵犯身体的每个脏器，造成全身衰竭。 造血干细胞是血液系统中的成体干细胞，具有长期自我更新 和分化成各类成熟血细胞的能力。如下图为造血干细胞可分 类形成各种血细胞，如红细胞、血小板和白细胞： 造血干细胞分化成各类血细胞（图片来自 cancer.gov 网站） 白血病致病因素有哪些呢？ 现阶段认为白血病的发病因素： 化学因素、 电离辐射、药物、 毒物、病毒、遗传因素等有关。 白血病主要分为四类 根据白血病细胞的成熟程度和自然病程，白血病可分为急性 和慢性两大类，临床上，白血病共分为四大类：急性髓系白 血病（ AML ）、急性淋巴细胞白血病（ ALL ）、慢性髓系白血 病 （CML ）和慢性淋巴细胞白血病 （CLL ）。儿童白血病 90% 以上是急性的，其中急性白血病中 70% ～80% 是 ALL 。 第二章： 实验研究所用白血病模型首先，来了解一下常用 的细胞株白血病中常用的小鼠品系 用于建立白血病小鼠模型的小鼠可分为近交系和突变系。根 据不同类型和目的选择不同的小鼠品系，具体如下图所示： 最后说说常用的动物模型，主要分为三类： 一、异种移植模型 异种移植模型是最常用的淋巴瘤动物模型。根据实验目的选 择相应的小鼠品系和细胞株后，通常细胞的接种方式为皮下 注射、腹腔注射和尾静脉注射。 皮下注射和腹腔注射操作简单，很快在接种部位形成肿瘤或 腹腔内形成多发性肿瘤，适合筛选针对白血病的药物。但该 类模型与白血病临床病人实际情况差距较大。异种移植型白 血病模型异种移植示意图 [2] 尾静脉注射接种模型，可形成全身性扩散的白血病模型。符 合白血病临床过程规律，此模型以动物生存期作为评价药效 的主要指标，并对采血样本进行血细胞的形态学检测。 下面以尾静脉注射模型实验步骤为例： 根据实验目的选择实验小鼠和细胞 （如NOD-SCID 小鼠和人 急性早幼粒细胞白血病细胞株） ；荷瘤细胞量一般 1-2 × 105/ 只。 破坏动物残留的免疫能力：给予小鼠射线照射（如 1.5Gy 剂 量 60Co γ射线全身照射） ； 细胞接种：小鼠射线照射 4-5 天后，收集对数期生长的细胞， 尾静脉注射细胞悬液； 移植后第二天对小鼠分组，进行给药；统计小鼠生存率。 评价：此种模型易建立，成瘤率高，成瘤时间差异小，是筛 选抗肿瘤药物常用的动物模型。 数据分析：小鼠经 X 射线照射后尾静脉注射 2 ×105个 hMRP8-PML- RARα 细胞， 建立 ATRA 耐药移植型小鼠模型 [3] 。如下图： 图 A 统计生存曲线，给药组（ LG362B 和阳性药 ATRA ）均 可延长小鼠生存期。 图 C 与 D 剥离小鼠脾脏拍照