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高效液相色谱 摘 要：论述了高效液相色谱 [1] 的发展史，了解了高效液相色谱的组成结构、操作原理以 及方法等等。 掌握它的分类方法， 通过比较得出高效液相色谱分析方法的优点与缺点。 明确 高效液相色谱的应用，最终分析结果。 关键词： 高效液相色谱；发展史；应用 Abstract : Discuss the development history of high performance liquid chromatography (HPLC), knows the composition of high performance liquid chromatography (HPLC) structure, operating principle and method, etc. Master it,s classification method, through the conclusion shows high performance liquid chromatographic analysis method of the advantages and disadvan-tages. Clear the application of high performance liquid chromatography (HPLC), finally analysis the result. Key words： High performance liquid chromatography (HPLC); Development history; application 引 言：从 1903年 Tswett 发表了吸附色谱分离植物色素的论文至今 , 色谱技术已有近百 年的发展历史。 特别是 60年代现代液相色谱技术的问世 , 使其在生命科学、 药物化学、 食品 卫生、环境化学等诸多领域得到了广泛的应用。 经过多年的发展 , 现代高效液相色谱技术得 到了不断的完善和改进 , 在输液泵、 检测器、 色谱柱及数据控制和处理系统等方面采用了许 多专利技术 , 使泵的稳定性和重复性、 检测器的灵敏度和检出能力、 色谱柱的分离效能和应 用范围及数据处理软件的智能化得到了很大的提高。 高效液相色谱是以液体为流动相， 采用 高压输液系统， 将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、 缓冲液等流动相泵入装 有固定相的色谱柱， 在柱内各成分被分离后， 进入检测器进行检测， 从而实现对试样的分析。 1. 高效液相色谱的发展史及其与其它色谱法的比较 1.1 高效液相色谱的发展史 高效液相色谱作为色谱分析法的一个分支，是在二十世纪 60 年代末期，在经典液相色 谱法和气相色谱法的基础上，发展起来的新型分离分析技术。 1960 年中后期，气相色谱理 论和实践的发展，以及机械、光学、电子等技术上的进步，液相色谱开始活跃。到 60 年代 末期把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱就出现了高效液相色谱。 1.2 高效液相色谱与其它色谱的比较 [2] 1.2.1 与经典液相色谱的比较 经典液相色谱法使用粗粒多孔固定相，装填在大口径、长玻璃柱管内，流动相仅靠重 力流经色谱柱，溶质在固定相的传质、扩散速度缓慢，柱入口压力低，柱效低，分析时间冗 长。 高效液相色谱法使用了全多孔微粒固定相， 装填在小口径、 短不锈钢柱内， 流动相通过 高压输液泵进入高柱压的色谱柱， 溶质在固定相的传质， 扩散速度大大加快， 从而在短的分 析时间内获得高柱效和高分离能力。 1.2.2 与气相色谱法的比较 高效液相色谱法