实验三细菌的简单染色与形态观察.docxVIP

实验三细菌的简单染色与形态观察 一、 目的要求： 了解并掌握细菌简单染色的机理及技术； 学会用油镜观察细菌细胞的形态。 二、 实验材料： 菌种：枯草杆菌Bacillus subtilis、大肠杆菌Escherichia coli＞金黄色葡萄球菌StapHyloccus aureus等培养好的细菌斜面； 染料：结晶紫 其他：显微镜、载玻片、接种环、酒精灯、无菌水、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸。 三、 基本原理： 染色是细菌学上一个重要而基本的操作技术。因细菌细胞小而且透明，当把细菌悬浮 于水滴内，用光学显微镜时，由于菌体和背景没有显著的明暗差，因而难以看清它们的形态, 更不易识别其结构，所以，用普通光学显微镜观察细菌时，往往要先将细菌进行染色，借助 于颜色的反衬作用，可以更清楚地观察到细菌的形状及其细胞结构。 用于微生物染色的染料是一类苯环上带有发色基团和助色基团的有机化合物。发色基 团赋予化合物的颜色特征，助色基团则给予化合物能够成盐的性质。染料通常都是盐，分酸 性染料和碱性染料两大类。在微生物染色中，碱性染料较常用，如常用的美蓝、结晶紫、碱 性复红、沙黄、孔雀绿等都属于碱性染料。 简单染色是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。此法操作简便，适于菌体一般 形状和细菌排列的观察。常用碱性染料进行简单染色，这是因为：在中性、碱性和弱酸性溶 液中，细菌细胞通常带负电荷，而碱性染料电离