斑马鱼的性腺发育PPT课件.ppt

步骤二、交配前准备 产卵前一天的准备： 挑选出适当的公鱼跟母鱼，体长要尽量一样，母鱼可以略大一些。 将公鱼与母鱼分别放置产卵缸的两侧，中间设置隔板将其隔开。 产卵房的准备 放入隔板及斑馬魚 上盒與普通下盒組裝 上盒底以網狀材料代替 产卵房的准备 避免刚产出的鱼卵被成鱼吃掉，而有的特殊设计！ 1 2 3 4 步骤三、交配当天 光周期控制的隔天清晨，当天亮后约十分钟，公鱼和母鱼会恢复清醒。 当母鱼发现公鱼时，由于前一天的费洛蒙影响，母鱼在天亮后也释放另一种费洛蒙，使公鱼往母鱼方向前去的行为更加明显及强烈。 此时就可以准备打开隔板，让公鱼跟母鱼进行交配。 交配中 公鱼在交配的过程中，采绝对主动方式，会先以眼睛观察并决定要向哪一只母鱼进行攻势。其次会进行求偶舞蹈，在想要交配的母鱼周围绕圈圈或是８字型，游向母鱼后，利用腹部侧面摩擦母鱼，刺激母鱼排卵，公鱼便会同时射精。 产卵 母鱼会一次把全部腹中的卵包括卵囊全部排出，一胎约会生出200-500颗卵。排出后母鱼会重新产生新的卵，约3-5天就可以再生下一次卵。 伴随着卵的释放，会有其他激素一起排出，这种激素可以让母鱼顺利把卵排放出来，另外一个功能则是让其他还产生卵的母鱼，停止排卵的行为，这在演化上算是一种竞争的结果。 注意事项（1） 母鱼体内的卵，如果太长时间没有交配，或是没有完全排完，卵会留在体内，并不会重新被吸收回去，如果超过太久没有排卵，母鱼腹部中的卵会死亡，并且造成母鱼腹部类似囊肿的残留物，这种囊肿会让母鱼下次排卵不顺，甚至无法排卵而被公鱼激烈的追求之后而难产死亡，目前也没有较好的方式改善这种情况。一般认为，固定一段时间就让公鱼跟母鱼进行交配，让母鱼把卵排出，是较好的方式。 注意事项（2） 斑马鱼的卵在受精后，约72小时即可孵化，在这段期间内，不需要给予打气，只要放在干净的水中即可孵化。放在解剖显微镜下，即可清楚的看到斑马鱼胚胎发育的整个经过。 人工受精 将鱼放入冰水中，直至不太活动为止。 记录鱼的体长、体重 雌鱼：轻压腹部，卵子流出。收集到小培养皿中。 雄鱼：同雌鱼。加1mlD-hanks液稀释。 将稀释精子加入卵子中。 斑马鱼卵巢的获得 发育成熟且腹部膨大的雌性斑马鱼体表用75％酒精消毒，用眼科剪小心剪开腹部后，迅速用眼科镊取白色半透明的两侧卵巢置于已除菌的清洗液D-Hank溶液中 卵细胞的分离 用D-Hank’s溶液洗去卵巢周围附带的脂肪、结缔组织及血块等杂质。 将部分卵巢置于一装有新鲜D-Hank’s溶液的培养皿中，用眼科镊小心撕开卵巢外膜并轻轻抖动，同时用另一眼科镊将卵细胞从结缔组织中剥离。此种卵母细胞外被滤泡膜。 当卵细胞基本从卵巢中分散出来后，选出滤泡膜完整的卵母细胞，用移液管轻轻吹打卵细胞5-10次至卵细胞单个分离。 用D-Hank’S溶液洗涤分离好的卵细胞2-3次。 可编辑 可编辑 斑马鱼的性腺发育 精巢的组织学结构和不同发育阶段生殖细胞形态 精巢一对，位于腹腔背部两侧，体积较小，以系膜与体壁相联，左右精巢彼此分开，在尾端合并成一条很短的输精管，和一般鲤科鱼类相同。 生殖上皮随着结缔组织向精巢内部延伸，形成许多隔膜，把精巢分成许多不规则的精小叶，从其横切面上可见许多精小叶紧密排列，但没有一定的规律性，精小叶为精巢的实质部分，因其呈管状又可称为精小管。 在精小叶内由许多精小囊组成，随着精巢的发育，精小叶内各精小囊间生精细胞发育不同步，而在同一精小囊内生精细胞发育是同步的。 精小叶中央为小叶腔，小叶腔在精巢内相互连接成网状，最后通到输精管，精原细胞位于精小叶的边缘处，在分化过程中，当生殖细胞在精小囊内发育成为成熟的精子时，精小囊破裂，成熟的精子释放到小叶腔中，各小叶腔内的精子最后汇集到输精管内并可借助于输精管排出，因此成熟的精子只在小叶腔和输精管内存在。 生殖细胞在发生上由外向里可分为精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和精子。 繁殖期，V期精巢 III期精巢；小叶腔明显，初级精母细胞排列多层，比例尺示24μm Sg，精原细胞；ScⅠ，初级精母细胞；ScⅡ，次级精母细胞；St，精子细胞；Sz，精子；LL，小叶腔；LC，间质细胞；SC，支持细胞；ST，精小囊 VI期晚期精巢，示精小囊内发育同步的各期生殖细胞，比例尺示24μm Sg，精原细胞；ScⅠ，初级精母细胞；ScⅡ，次级精母细胞；St，精子细胞；Sz，精子；LL，小叶腔；LC，间质细胞；SC，支持细胞；ST，精小囊 V期早期精巢，示精原细胞，精母细胞，精子细胞和精子，比例尺示24μm Sg，精原细胞；ScⅠ，初级精母细胞；ScⅡ，次级精母细胞；St，精子细胞；Sz，精子；LL，小叶腔；LC，间质细胞；SC，支持细胞；ST，精小囊 V期中期精巢，示成熟的精子充满整个精小叶，比例尺示24μm； Sg，精原