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3)总状毛霉:生长迅速,菌落呈毛状,高可达1cm,灰色疏松。镜检见孢囊梗最初不分枝,以后不规则分枝。孢子囊球形,淡黄色。成熟时孢囊壁消解,囊轴球形。孢囊孢子卵形。 4)伞梨头霉:异名为伞状毛霉。菌落呈毛状、生长快,数日可长满斜面和琼脂平板。菌落粗糙,初为白色,后变为淡蓝灰色,背面深灰至黄绿色。孢囊梗长并呈伞形分枝,孢子囊灰色,囊轴圆形光滑,有囊托。孢囊孢子近球形,表面光滑。无厚壁孢子。 3.药物敏感试验 对两性霉素B敏感,静 脉滴注疗效较好。 4.抗体检测 用琼脂双扩散、ELISA法检 测病人体内特异性抗体。即用匀浆抗原 检测毛霉抗体的敏感性和特异性都较高。 也可用免疫荧光技术在组织切片中检测 和鉴定毛霉。 五、组织胞浆菌 有荚膜组织胞浆菌和杜波组织胞浆菌两个种。 主要侵犯网状内皮系统,荚膜组织胞浆菌引起: ①原发急性型组织胞浆菌病,仅皮肤试验阳性。 ②慢性空洞型,引起肺损害,常被误诊为肺结 核。 ③严重播散型,全身器官均可损伤,预后严重。 淋巴瘤、白血病、霍奇金病、AIDS或用肾上 腺皮质激素治疗者常可感染本菌。 微生物特性 组织胞浆菌是一种双相型真菌,在25℃培养时 呈典型菌丝体,在37℃培养时为酵母型,位于 细胞内或外。卵圆形,直径为2~4μm、芽生 孢子,一端较尖,一端较圆,自细,有荚膜。 杜波组织胞浆菌圆形,直径为12~15μm、薄 壁的芽生孢子。 微生物检验 (1)标本直接显微镜检查 痰液标本涂片后先用甲醇固定10 min,再用 姬姆萨染色镜检,如巨噬细胞发现卵圆形, 直径2~4μm的较小,一端有出芽,可疑为 荚膜组织胞浆菌。 皮损、脓液标本,用20%KOH涂片后镜检, 可见12-15μm直径的厚壁酵母细胞,细胞内 可见脂肪小滴,可疑为杜波组织胞浆菌。 (2)抗原检测 取患者痰液作免疫荧光法染色后镜检,可 快速检测其抗原,但特异性差,仅作组织 胞浆菌初筛试验。 (3)分离培养 将临床标本接种于含抗生素的沙氏培养基 上,25℃培养,生长缓慢,4~6周才开始 生长,逐渐形成白色至棕色绒毛状菌落。 当转种于血琼脂培养基上,37 ℃很快形成 酵母型菌落。 (4)鉴定 取可疑菌落涂片染色镜检,并作脲酶试验和明 胶液化试验。荚膜组织胞浆菌分解尿素;而杜 波组织胞浆菌不分解尿素,在24~96h内可液 化明胶,而荚膜组织胞浆菌则否。 (5)药物敏感试验 组织胞浆菌对两性霉素B、酮 康唑、伊曲康唑敏感。 (6)抗体检测血清中组织胞浆菌抗体,以补体结 合试验的敏感性和特异性最高,发病2-3周阳 性率可达90%,有判定顶后价值。 补体结合试验的抗体效价在1:32以上为阳性, 抗体效价4倍增长,可有助于确诊。 乳胶凝集试验时,抗体效价为1:32时可确诊。 六、卡氏肺孢菌 曾称为卡氏肺孢子虫。分类还存在一些争议。已往大多数学者依据抗原虫药有效和具有孢囊、滋养体两种形态,认为应属于原虫。 近来分子生物学研究发现,卡氏肺孢子虫线粒体的16s和5s核糖体RNA的核苷酸序列与真菌有更多的同源性,染色特性也类似真菌,应归属于真菌。 卡氏肺孢菌广泛分布于自然界,主要是空气传播,在健康人体内,多为无症状的隐性感染。当宿主免疫力下降,潜伏的卡氏肺孢菌在病人肺内大量繁殖扩散,使肺泡上皮细胞受损,导致间质性浆细胞肺炎,又称卡氏肺孢菌性肺炎, 是AIDS最常见、最严重的机会感染性疾病,病死率高达70%—100%。 微生物特性 生活史有包囊和滋养体两种形态。 滋养体壁较薄,单个核,形态不规则,直径2~5μm,姬氏染色后胞质呈蓝色,核呈紫红色。 包囊为感染型,滋养体为繁殖型,呈二分裂法繁殖。 包囊分为成熟包囊和未成熟包囊,前者壁较厚,直径6~8μm,呈球形,内含8个囊内小体,大小1~1.5μm,呈球形排列规则或不规则单个核;后者一般呈椭圆形,3~5μm,囊内核 1~8个。 微生物检验 (1) 标本直接显微镜检查 收集病人痰液和纤维支气管镜取材,涂 片姬氏染色后镜检,可见包囊内的8个 囊内小体,胞质呈浅蓝色,核1个呈紫 红色。 (2)抗原检测:用单克隆抗体来检测病人血 清中卡氏肺孢菌抗原,有较好的敏感性 和特异性。 (3)核酸检测:现已将卡氏肺孢菌线粒体中 的5srDNA和16srDNA扩增成功。基因探 针可用于标本检测,其敏感性和特异性 都可以,但技术难度高。 (4)抗体检测 用IFA、ELISA、CFT检测人 群血清中卡氏肺孢菌抗体,可用于流行 病学调查临床诊断价值不大。
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