酶工程动植物细胞培养产酶.ppt

(八) 刺激剂应用 刺激剂(elecitor) 能够促进植物细胞中物质代谢朝着一些次级代谢物生成方向进行, 从而强化次级代谢物生物合成, 提升一些次级代谢物产率。所以在植物细胞培养过程中添加合适刺激剂能够显著提升一些次级代谢物产量。 常见刺激剂: 微生物细胞壁碎片和果胶酶、纤维素酶等微生物胞外酶。 四、植物细胞培养产酶工艺过程 以大蒜细胞培养生产超氧化物歧化酶（SOD）为例 (1)大蒜愈伤组织诱导 选择坚固、饱满、无病虫害大蒜蒜瓣, 去除外皮, 先用70%乙醇消毒20s, 再用0.1%升汞消毒10min, 然后无菌水漂洗3次。 在无菌条件下, 切成0.5cm3小块, 植入含有3mg/L 2,4-D和1.2mg/L 6-BA 半固体MS培养基中, 在25℃, 600lux, 12h/d光照条件下培养18d, 诱导得到愈伤组织, 每18天继代一次。 (2)大蒜悬浮细胞培养 将上述在半固体MS培养基上培养18d愈伤组织, 在无菌条件下转入含有3mg/L 2,4-D和 1.2mg/L 6-BA （苄基腺嘌呤） 液体MS培养基中, 加入灭菌玻璃珠, 25℃, 600lux, 12h/d光照条件下震荡培养18d, 使愈伤组织分散成为小细胞团或单细胞。 然后在无菌条件下, 经过筛网将小细胞团或单细胞转入含有3mg/L 2,4-D和1.2mg/L 6-