酶联免疫测法.ppt

标识酶要求: 活性高 性质稳定 专一性强 酶催化底物显色信号易于判定和测量 方法敏感, 反复性好, 简单易行 酶底物易于配制保留, 酶及底物价廉 (3)酶和酶作用底物 酶及其底物 酶结合物是酶与抗体或抗原, 半抗原在交联剂作用下联结产物。是ELISA成败关键试剂, 它不仅含有抗体抗原特异免疫反应, 还含有酶促反应, 显示出生物放大作用, 但不一样酶选择不一样底物 , 将得到不一样颜色反应. 酶 底 物 显色反应 测定波长 辣根过氧化物酶 邻苯二胺四甲替联苯胺氨基水杨酸邻联苯甲胺2,2‘-连胺基-2(3-乙基-并噻唑啉磺酸-6)铵盐 橘红色黄色棕色兰色蓝绿色 492 460 449425642 碱性磷酸酯酶 4-硝基酚磷酸盐(PNP)萘酚-AS-Mx磷酸盐+重氮盐 黄色红色 400500 葡萄糖氧化酶 ABTS+HRP+葡萄糖葡萄糖+甲硫酚嗪+噻唑兰 黄色深蓝色 405 420 β-Ｄ－半乳糖苷酶 甲基伞酮基半乳糖苷(4MuG)硝基酚半乳糖苷(ONPG) 荧光黄色 360,450420 4 对照设定 阳性对照品(pos