五日生化需氧量的测定(1).pdfVIP

实验七 五日生化需氧量的测定 原理 生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在于水中的某些可氧化物质，主要是有 机物质所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。分别测定水样培养前的溶解氧含量和在 20± 1℃培养五天后的溶解氧含量，二者之差即为五日生化过程所消耗的氧量（ BOD5 ）。 对于某些地面水及大多数工业废水、生活污水，因含较多的有机物，需要稀释后再培 养测定， 以降低其浓度， 保证降解过程在有足够溶解氧的条件下进行。 其具体水样稀释倍数 可借助于高锰酸钾指数或化学需氧量（ CODCr ）推算。 对于不含或少含微生物的工业废水，在测定 BOD5 时应进行接种，以引入能分解废水中 有机物的微生物。 当废水中存在难于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有机物或 含有剧毒物质时，应接种经过驯化的微生物。 仪器 1. 恒温培养箱。 2.5 — 20L 细口玻璃瓶。 3.1000 — 2000mL量筒。 4. 玻璃搅棒：棒长应比所用量筒高度长 20cm。在棒的底端固定一个直径比量筒直径略 小，并带有几个小孔的硬橡胶板。 5. 溶解氧瓶： 200— 300mL，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口。 6. 虹吸管：供分取水样和添加稀释水用。 试剂 1. 磷酸盐缓冲溶液：将 8.5g 磷酸二氢钾（ KH2 PO4 ），21.75g 磷酸氢二钾（ K2HPO4 ）， 2 4 2 4 33.4g 磷酸氢二钠（ Na HPO ·7H O）和 1.7g 氯化铵（ NHCl ）溶于水中，稀释至 1000mL。此 溶液的 pH应为 7.2 。 2. 硫酸镁溶液：将 22.5g 硫酸镁（ MgSO4 ·7H2O）溶于水中，稀释至 1000mL。 3. 氯化钙溶液：将 27.5g 无水氯化钙溶于水，稀释至 1000mL。 4. 氯化铁溶液：将 0.25g 氯化铁（ FeCl 3 ·6H2O）溶于水，稀释至 1000mL。 5. 盐酸溶液（ 0.5mol/L ）：将 40mL （ρ=1.18g/mL ）盐酸溶于水，稀释至 100mL。 6. 氢氧化钠溶液（ 0.5mol/L ）：将 20g 氢氧化钠溶于水，稀释至 1000mL。 7. 亚硫酸钠溶液 （1/2Na2SO3=0.025mol/L ）：将 1.575g 亚硫酸钠溶于水， 稀释至 1000mL。 此溶液不稳定，需每天配制。 6 12 6 2 2 2 8. 葡萄糖 - 谷氨酸标准溶液：将葡萄糖（ C H O ）和谷氨酸（ HOOC— CH— CH—CHNH— COOH）在 103℃干燥 1h 后，各称取 150mg溶于水中，移入 1000mL容量瓶内并稀释至标线， 混合均匀。此标准溶液临用前配制。 9. 稀释水： 在 5— 20L 玻璃瓶内装入一定量的水， 控制水温在 20 ℃左右。 然后用无油空 气压缩机或薄膜泵， 将此水暴气 2— 8h ，使水中的溶解氧接近于饱和， 也可以鼓入适量纯氧。 瓶口盖以两层经洗涤晾干的纱布，置于 20℃培养箱中放置数小时，使水中溶解氧含量达 8mg/L 左右。临用前于每升水中加入氯化钙溶液、氯化铁溶液、硫酸镁溶液、磷酸盐缓冲溶 液各 1mL，并混合均匀。 稀释水的 pH值应为 7.2 ，其 BOD5 应小于 0.2mg/L 。 10. 接种液：可选用以下任一方法，以获得适用的接种液。