悦肝胶囊对四氯化碳损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用.docVIP

悦肝胶囊对四氯化碳损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：悦肝胶囊对四氯化碳损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用 1 1 材料 2 2 方法 3 3 结果 4 4 讨论 4 文2：柴胡皂苷d对乙醇损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用及其机制研究 6 1 器材与方法 6 2 结果 8 3 讨论 9 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 12 正文 悦肝胶囊对四氯化碳损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用 文1：悦肝胶囊对四氯化碳损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用 Protective Effects of Yuegan Capsule on CCl4induced Injury of Primary Cultured Rat Hepatocytes Abstract：ObjectiveTo investigate the effects of Yuegan Capsule on CCl4intoxicated primary cultured rat injury models were induced by CCl4 in rats in vitro, and treated with Yuegan of rat hepatocytes and effect of SDH、ACPase、G6Pase activeties and amount of hepatic glycogen were observed. ResultsThe Yuegan Capsule increased the activity of SDH, G6Pase and the amount of hepatic glycogen, and restrain the activity of ACPase, and could improve the changes of rat hepatocytes capsule has protective effects on CCl4induced injury of primary cultured rat hepatocytes. Key words：Yuegan Capsules; Liver failure; Rats; Hepatocytes 悦肝胶囊主要由葛根、丹参、西洋参、麦冬等中药组成，是吉林省延边中 医院 肝病科以“活血化瘀、通络养肝”为基本治则而研制的复方中药制剂，具有利胆退黄及保肝解毒作用［1，2］。原代培养肝细胞已用于多方面的研究，其灵敏度高、参差性小、再现性好。本实验以CCl4诱导大鼠肝细胞损伤模型，观察悦肝胶囊对CCl4损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用，并进一步探讨了其机理。 1 材料 动物 Wistar系大鼠（乳鼠）由延边大学医学部资产与实验管理办公室实验动物科提供。 药品与试剂悦肝胶囊：延边大学医学部药学院天然药物教研室分离、提取（葛根30 g，丹参30 g，麦冬20 g，西洋参20 g，加蒸馏水煮1 h后过滤，滤出液备用，把原药再煮沸1 h后过滤，混合2次滤液浓缩成100 ml）；CCl4：北京化学试剂厂产品；东宝肝泰片： 中国 通化东宝药业股份有限公司产品；新生小牛血清：杭州四季青生物工程公司产品；RPMI1640培养基：GIBCO公司产品；胰蛋白酶：DIFCO公司产品；胶原酶：SIGMA化学公司产品。 仪器 SC35型倒置显微镜：日本OLYMPUS产品；VANOX型万能显微镜：日本OLYMPUS产品；S3500N型扫描电镜：日本HITACHI公司产品；TD2000型图像分析仪：北京天地百年科技有限责任公司产品。 2 方法 原代单层乳鼠肝细胞培养方法采用姜玉顺等［3］建立的方法培养至3~4 d后用于实验。 CCl4诱发培养肝细胞损伤病理模型的制备 用RPMI1640培养液配成3，5，7 mol/L浓度经筛选，选用5 mol/L浓度为本实验可逆性肝细胞损伤模型。 分组培养大鼠肝细胞3~4 d，取生长良好的培养瓶40瓶分为4组。正常对照组每隔3天更换培养基；模型对照组加入5 mol/L CCl4 ；药物对照组加入 5 mol/L CCl4 + mg/L 东宝肝泰；实验组加入5 mol/L CCl4+ mg/L悦肝胶囊。作用24 h后，模型对照组换接种培养基；药物对照组换加有 mg/L东宝肝泰的培养基；实验组换加有 mg/L悦肝胶囊的培养基继续培养。 细胞化学观察取生长盖玻片，显示SDH、ACPase、G6Pase和糖原。SDH显示采用亚铁氰化甲法；ACPase显示采用Gomori法；G6Pase显示采用