邻二氮菲分光光度法测定微量铁.pdfVIP

实验一 邻二氮菲分光光度法测定微量铁的条件 一、实验目的 1、掌握分光光度计的原理、构造和使用方法。 2 、学习分光光度计分析中如何确定最佳实验条件。 二、实验原理 在可见光区分光光度法测量中，通常是将被测物质与显色剂反应，使之生成有色物质，然后 测其吸光度，进而求得被测物质的含量。显色反应的程度受显色剂用量、显色时间，显色液酸度 等条件的影响，通过实验，确定合适的显色条件。 三、仪器及试剂 分光光度计； 1cm吸收池； 10mL移液管； 25mL 容量瓶 ,100ml 容量瓶 1．铁标准溶液 100 μg ·mL -1 （即0.01 mg ·mL-1 ）铁标准溶液：准确称取 0.3511g （NH4 ）2 Fe （SO4 ）2 6H· 2O 于烧杯中，用 2 mol ·L-l 盐酸 15 mL 溶解，移入 500 mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。 -1 用前，准确稀释 10 倍成为含铁 10 ug mL· 标准溶液。 2. 1g.L-1 邻二氮菲： 1.0 g 邻二氮菲于小烧杯中，加入 5-10ml 95% 乙醇溶液溶解，再用水 稀释到 1000 mL 。 3. 10％盐酸羟胺水溶液： 10％水溶液（现用现配，避光保存） 4. 醋酸钠溶液 1mol/L 5. 0.8 mol/L 氢氧化钠溶液 四、实验步骤 1、吸收曲线的制作和测量波长的选择 用移液管吸取 0.0ml 、 2.0mL 10 ug ·mL -1 标准溶液，分别注入二个 25 mL 容量瓶中，加 入 1.0mL10% 的盐酸羟胺溶液，摇匀后放置 2 min ；再加 2 mL 邻二氮菲溶液， 2.5mL 醋酸钠 溶液溶液，用水稀释至刻度，摇匀。放置 5min 后，用 1cm 比色皿，以试剂空白为参比，在 440~560nm 之间，每隔 10nm 测一次吸光度，其中在 500-520 nm 之间，每隔 5nm 测一次吸 光度。然后以波长为横坐标，吸光度 A 为纵坐标，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长。 2、显色剂用量影响 -1 在 7 只 25mL 容量瓶中，各加 2.0 mL 10 ug ·mL 铁标准溶液和 1.0 mL 盐酸羟胺溶液，摇匀 -1 后放置 2 min 。分别加入 0.1 、0.25、0.5、1.0、2.0 、3.0 、4.0ml 1g.L 邻二氮菲溶液，再各加 2.5mL 1mol/L 醋酸钠缓冲溶液 ，以水稀释至刻度，摇匀。放置 5min 后，以水为参比，在 510 nm 测量各溶液的吸光度。 -1 其中，加 2.0 mL 1g.L 邻二氮菲溶液的显色溶液不要倒掉，用于时间影响的测定。 3、显示时间的影响 取上述 1 中加 2.0 mL 1g.L-1 邻二氮菲溶液的容量瓶， 在显色时间为 10min 、20min 、30min 、 40min 、50min 、60min 分别测定吸光度值。 4、溶液酸度的影响 -1 在 7 只 25mL 容量瓶中，各加入 2.0 mL 10 ug mL· 铁标准溶液和 1.0 mL 盐酸羟胺溶液，摇 -1