柳叶洗眼液的制备及猴肾传代细胞中抗EV70病毒的实验研究.docVIP

柳叶洗眼液的制备及猴肾传代细胞中抗EV70病毒的实验研究 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：柳叶洗眼液的制备及猴肾传代细胞中抗EV70病毒的实验研究 1 1 材料与方法 2 2 结果 5 3 讨论 6 文2：感停抗流感病毒的实验研究 6 1 实验材料 7 2 方法 8 3 结果 9 4 讨论 9 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 12 正文 柳叶洗眼液的制备及猴肾传代细胞中抗EV70病毒的实验研究 文1：柳叶洗眼液的制备及猴肾传代细胞中抗EV70病毒的实验研究 Preparation of Willow Leaves Eye Washing Liquid and Experimental Study of its Effect of Anti-EV70 Abstract：ObjectiveTo make a kind of willow leaves eye washing liquid and observe its antivirus washing liquid was made from fresh willow leaves by water extraction,extrafiltration and infected by EV70 and non-infected single layer of MEK cells were treated by the eye washing liquid at diffferent concentration .ResultsIts highest harmless concentration used to treat the MEK cells was 25 percent of the original EV70 proliferation was obviously inhibited through MEK cell treatment of eye washing liquid simultaneously EV70 leaves eye washing liquid is a kind of effective antivirus agent. Key words：Willow leaf; Eye washing liquid; Enterovirus70(EV70) 流行性出血性结膜炎（epidmic haemorrhagic conjunctivitis,EHC）是由肠病毒70型（enterovirus 70,EV70）感染所致的一种传染性极强的眼病，目前此病主要以抗病毒药物 治疗 ，但效果不甚理想，根据民间验方研制了柳叶洗眼液。为了更进一步了解柳叶洗眼液的抗病毒作用，我们选择了对EV70敏感并能产生细胞病变的猴胚肾（MEK）传代细胞作为检测系统，观察该药物的体外抗病毒效果。 1 材料与方法 材料UV265型紫外-可见分光光度计（日本岛津）；柳叶Salix .（秋天现采现用或采集后低温放置）；邻苯二酚（优级纯含量%）；其它试剂均为分析纯。 方法 柳叶洗眼液的制备 处方柳叶200 g，焦亚硫酸钠1 g，乙二胺四乙酸二钠 g，总量1 000 ml。 制备方法取柳叶200 g，用常水洗后，再用蒸馏水洗，置玻璃烧瓶中，加水500 ml，加热提取1 h，滤出液体，药渣再加水500 ml，提取1 h，滤出液体，合并两次滤液。浓缩至500 ml，加95%乙醇1 000 ml，搅动匀，静置24 h，过滤，减压回收乙醇，至无醇味，加蒸馏水950 ml，焦亚硫酸钠1 g，乙二胺四乙酸二钠 g，搅匀，用 mol#12539;L-1盐酸调pH 6~7，用 μm滤膜抽滤，最后定容至1 000 ml，灌封于100 ml玻璃瓶中，100℃流通蒸汽灭菌30 min。 质量标准 性状本品为淡黄色透明液体。 鉴别取柳叶洗眼液50 ml，置分液漏斗，加入乙醚50 ml，萃取3次，弃去水层，合并醚层，水浴回收乙醚，残渣用乙醇定容至5 ml。另取邻苯二酚制成每2 g#12539;L-1甲醇溶液，作为对照品。照薄层色谱法试验［1］，吸取教训上述两种溶液各2～10 μl。分别点于同一硅胶G薄层板上，以丙酮-25%氨水（99∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，于碘蒸气中放置1 min，在与对照品相应的位置上，供试品色谱分别显相同的红棕色斑点。 含量测定标准曲线的绘制：精密吸取邻苯二酚标准溶液（精密称取干燥至恒重的邻苯二酚10 mg,加95%乙醇5 ml溶解，加1mol#12539;L-1盐酸5 ml，用水定容至5 ml），，，，， ml量瓶中，分