Caspase83蛋白在PUVA诱导K562细胞凋亡时的变化临床医学.docVIP

Caspase83蛋白在PUVA诱导K562细胞凋亡时的变化临床医学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：Caspase83蛋白在PUVA诱导K562细胞凋亡时的变化临床医学 1 1材料与方法 2 文2：Bax蛋白在丁酸钠诱导食管癌细胞凋亡中的表达 6 1材料和方法 7 2 结果 8 2．1 倒置显微镜下观察结果 8 2．2 免疫组化检测凋亡相关基因bax蛋白的表达 8 3 讨论 9 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 11 正文 Caspase83蛋白在PUVA诱导K562细胞凋亡时的变化临床医学 文1：Caspase83蛋白在PUVA诱导K562细胞凋亡时的变化临床医学 Abstract： ObjectiveTo study the changes of Caspase8 and Caspase3 protei in K562 cells during apoptosis induced by psoralen (PSO) plus ultraviolet A (UVA) (PUVA). MethodsThe K562 cells were treated with PSO extracted from Chinese medicine psoralea fruits in different concentratio plus UVA (360 nm) in different irradiation time or not. Apoptosis ratios, ultrastructure changes and expression of Caspase8 and Caspase3 protei were detected. The factorial design and analysis of variance were used to analyze the interaction among the facto. ResultsPSO, UVA and PUVA all increased the apoptosis ratios and UVA and PUVA upregulated the expression of Caspase8 and Caspase3 protei, but the effects of PUVA were the strongest. There were obvious ultrastructure changes in apoptosis after treatment with PUVA. ConclusionPUVA can induce the apoptosis of K562 cells through activating Caspase8 and Caspase3 genes. Key words： photochemotherapy; K562 cell; apoptosis; Caspase8; Caspase3 化疗药物杀伤白血病细胞的主要途径是诱导细胞的凋亡，Caspases(Cysteinyl asparate specific proteinase)是一种特异性蛋白酶，以执行细胞凋亡而受到广泛关注［1~2］。Caspase8和Caspase3均属于该家族的成员，在凋亡过程中发挥重要作用，其中前者被认为是凋亡的启动者，后者被认为是凋亡的执行者［3］。PUVA是补骨脂素(psoralen，PSO)加长波紫外线（Ultraviolet A，UVA）光化学疗法，目前的研究对象多为人工合成PSO衍生物，我们从中药补骨脂中提取了PSO，研究PUVA在诱导人类白血病细胞K562凋亡时Caspase8、Caspase3蛋白的变化，以进一步了解PUVA诱导白血病细胞凋亡的作用机制。 1材料与方法 细胞株人慢性粒细胞白血病K562细胞由大连医科大学惠赠。常规培养于含10%小牛血清的RPMI1640培养基（含硫酸庆大霉素 U/ml）中，于37 ℃、5%CO2饱和湿度培养箱中进行连续培养。 药品及主要试剂 补骨脂素由大连理工大学及我院共同由纯中药补骨脂中提取和制备。RPMI1640培养液为Gibco产品。小牛血清系杭州四季青生物材料工程公司产品。HistostainTMPlUs Kits免疫细胞化学分析试剂盒购自美国Zymed公司。DAB(3，3’diaminobenzidine tetrahydrochloride)显色试剂盒购自美国Vector Ltd公司。Caspase8、Caspase 3兔抗人多