慢性胃炎胃粘膜组织幽门螺杆菌感染与π类谷胱甘肽S转移酶的相关性研究临床医学.docVIP

慢性胃炎胃粘膜组织幽门螺杆菌感染与π类谷胱甘肽S转移酶的相关性研究临床医学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：慢性胃炎胃粘膜组织幽门螺杆菌感染与π类谷胱甘肽S转移酶的相关性研究临床医学 1 1 资料与方法 2 13 研究方法 3 132 H Pylori的检测 3 2 结果 4 3 讨论 5 文2：谷胱甘肽S转移酶与幽门螺杆菌感染胃粘膜组织变化的相关性研究进展临床医学 7 1 GSTs的分类、诱导与调控及其意义 7 3 小结与展望 12 参考文摘引言： 12 原创性声明（模板） 14 文章致谢（模板） 14 正文 慢性胃炎胃粘膜组织幽门螺杆菌感染与π类谷胱甘肽S转移酶的相关性研究临床医学 文1：慢性胃炎胃粘膜组织幽门螺杆菌感染与π类谷胱甘肽S转移酶的相关性研究临床医学 慢性胃炎是多发病，其长期持续不愈不仅是困扰临床的一大难题，也是引起胃粘膜肠上皮化生和不典型增生并最终导致癌变的重要启动阶段。持续幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，H Pylori）感染已被公认为慢性胃炎、消化性溃疡的主要致病因素，与胃腺癌和胃淋巴瘤关系密切[1~3]，其确切致病机制尚不明确，可通过其产生的多种致病因子对胃粘膜造成广泛损伤。谷胱甘肽S转移酶（Glutathione Straferase，GSTs）是一个多功能的Ⅱ相解毒酶家族，是人体内一种重要的保护性物质，具有解毒和抗癌作用[5~8]，依GSTs同工酶亚基结构和等电点的不同，将GSTs分为α、μ、π、θ和σ等5种[9]，其中π类谷胱甘肽S转移酶（GSTπ）的机体保护作用大于其它同工酶类[10]。我们用SP免疫组化法检测了H Pylori感染与非感染慢性胃炎胃粘膜组织中GSTπ的表达，旨在探讨GSTπ的多重保护作用与H Pylori致毒作用的相互关系。 1 资料与方法 11 仪器及试剂 日本OLYMPUS240 电子 内镜，德国Wagner13C红外线能谱仪，日本OLYMPUS光学显微镜。13C尿素酶检测试剂购自德国Wagner北京办事处，即用型SP免疫组化试剂盒购自北京中山生物技术公司。 12 病例及分组 将20043~20051月于我院消化科就诊的患者，选择主诉上消化道症状6个月以上，经B超除外肝胆胰疾患，并除外1月内服用抗生素、半月内服用铋剂或制酸剂者[11~13]作为入选条件，经13C呼气检测查H Pylori，常规内镜检查及病理活检、Giemsa染色查H Pylori，将内镜及病理确诊、13C呼气检测与病 理学 检查H Pylori均阳性或均阴性（一阴一阳则剔除）作为研究对象共138例，其中男91例，女47例；年龄17~63岁，平均42岁；内镜及病理检测结果为慢性浅表性胃炎96例，慢性萎缩性胃炎42例；每组又分为H Pylori阳性和H Pylori阴性两个亚组。 13 研究方法 131 内镜及病理活检 所有病例由有经验的内镜医师行常规内镜检查并于病变明显处取活组织5块，活检标本入100g·L-1中性福尔马林液中固定(24h)，常规梯度乙醇脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，制作厚5~7μm切片6张裱贴在涂有蛋白甘油的载玻片上，37℃储存备用。 132 H Pylori的检测 1321 13C呼气检测法 受检者空腹6h以上，收集0时气100mL备用，将13C尿素酶试剂溶入120mL橙汁服下，30min准时收集待测气100mL，将待测气与0时气连接13C红外线能谱仪检测孔，自动检测，生成报告，以DOB值大于25为阳性。 1322 改良Giemsa法 组织切片脱蜡充分复水，入20g·L-1Giemsa染液中染色30min，洗去染液，脱水、透明、封片，油镜观察。 133 HE染色常规病理学检查 组织切片脱蜡复水，梯度乙醇脱水，水洗后入苏木素染液中染色20min，10g·L-1盐酸分色，充分水洗后10g·L-1氨水蓝化，水洗后入伊红染液中染色1min，梯度乙醇脱水，透明封片。 134 GSTπ免疫组化检测 切片脱蜡复水，以30g·L-1过氧化氢灭活内源性酶，1g·L-1胰蛋白酶抗原修复，滴加正常山羊血清封闭液，滴加一抗兔抗人GSTπ，4℃过夜，滴加生物素化二抗20℃~37℃20min，ABC复合物20℃~37℃20min，以上各步均以PBS充分洗涤。DAB显色，苏木素轻度复染，脱水、透明、封片，高倍镜下观察。 14 统计学处理 采用χ２检验，用spss软件包进行统计分析，以P005为有统计学差异。 2 结果 改良Giemsa染色后H Pylori为红色，呈“S”状，分布在胃小凹和腺腔中，与粘