超高压水射流对黄柏提取液中盐酸小檗碱含量影响的研究临床医学.doc

超高压水射流对黄柏提取液中盐酸小檗碱含量影响的研究临床医学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：超高压水射流对黄柏提取液中盐酸小檗碱含量影响的研究临床医学 1 1 仪器、试剂与材料 2 2 方法与结果 2 3 讨论 4 文2：超高压水射流对五味子中五味子醇甲含量影响的研究 6 1 仪器与材料 6 2 方法与结果 7 3 讨论 9 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 11 正文 超高压水射流对黄柏提取液中盐酸小檗碱含量影响的研究临床医学 文1：超高压水射流对黄柏提取液中盐酸小檗碱含量影响的研究临床医学 超高压水射流技术是近几十年 发展 起来的一项新技术，它是指普通水经过超高压加压器，将水加压至100～400 MPa，然后通过一个直径约为 mm左右的细小宝石喷嘴，产生600～1 000 m的水箭，可用来切割各种材料，也可对各种物体表面进行清洗，甚至用来食品灭菌，以达到食品保鲜的目的[1]。黄柏(Corter Phellodendri Chineis)为芸香科植物黄皮树Phellodendron chinee Schneid.的干燥树皮，习称“川黄柏”，始载于《神农本草经》，列为上品，具有清热燥湿、泻火解毒、退虚热之功效[2]， 现代 药 理学 研究表明黄柏具有抗病原微生物、抗溃疡、降压、抗心律失常等作用[3]，临床应用十分广泛。盐酸小檗碱为黄柏的主要有效成分之一，与抗菌消炎作用密切相关[4]，可作为检测产品质量的主要指标之一，但小檗碱对热很不稳定，受热易破坏[5]，为探讨中药新的加工处理方法，提高中药的有效成分含量，本文用HPLC法测定黄柏醇提液经超高压水射流处理前后盐酸小檗碱的含量。现报道如下。 1 仪器、试剂与材料 LC-20AT高效液相色谱仪，包括LC-20AT泵、SPD-20A紫外检测器、AT-330柱温箱、Class-VP数据处理系统、7725i进样阀(日本岛津公司);DPSB-3040型超高压水射流系统(南京大地水刀股份有限公司) 黄柏为市售，经本院王盛民教授鉴定为芸香科植物黄皮树Phellodendron chinee Schneid.的干燥树皮;盐酸小檗碱对照品(购自 中国 药品生物制品检定所，批号：110713-200208);乙腈为HPLC级(美国Fisher公司);所用水为超纯水;其余试剂均为分析纯。 2 方法与结果 供试品溶液的制备称取黄柏药材粗粉约500 g，精密称定，8倍量75%的乙醇回流提取3次，2 h/次，合并提取液，过滤，减压浓缩，回收乙醇至无醇味，溶液定容至1 500 ml。量取黄柏提取液200 ml，用超纯水稀释至25 L，分别在150，200，250，300和350 MPa压力条件下，经超高压水射流处理，将各溶液摇匀、静置，分别取未经处理和各处理液的上清液过 μm微孔滤膜，分别标号为0，1，2，3，4，5号，作为供试品溶液。 对照品溶液的制备精密称取在100℃干燥5 h的盐酸小檗碱对照品 mg，置25 ml容量瓶中，加流动相溶解，稀释至刻度，摇匀;精密量取2 ml，置10 ml容量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得(每毫升含盐酸小檗碱 mg) 丹参的薄层色谱鉴别照薄层色谱法实验，吸取“”和“”项制备的供试品溶液和对照品溶液各10 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10∶6∶1∶1)为展开剂，置氨蒸气预饱和的展开缸内展开，取出晾干，置紫外灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。斑点较为圆整，分离效果好，各供试品斑点大小及Rf值无显著差异。 HPLC色谱条件Symmetry R C18( mm×250 mm，5 μm)色谱柱(美国Wate);流动相为乙腈-%磷酸溶液-十二烷基(50∶50)(每100ml加十二烷基磺酸钠 g);检测波长265 nm;流速 ml·min-1;柱温30 ℃;进样量10 μl。在该色谱条件下，理论塔板数按盐酸小檗碱峰 计算 不低于5 000，且样品中盐酸小檗碱与其他组分分离效果良好，对照品及样品的色谱图见图1。 a-盐酸小檗碱对照品 b-黄柏样品 Ⅰ. 盐酸小檗碱峰 图1 对照品及黄柏样品HPLC图 线性关系考察分别精密吸取“”项下制备的盐酸小檗碱对照品溶液2，4，6，8，10 μl进样测定，记录各峰面积。以盐酸小檗碱进样量(μg)为横坐标X，峰面积为纵坐标Y，得回归方程Y=982 ，r= 9(n=5)。结果表明盐酸小檗碱在～ μg范围内与峰面积有良好的线性关系。 精密度实验精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液10 μl，重复进样5次，测定峰面积，得D为 % 稳