广西苦丁茶提取物体外抗单纯疱疹病毒1型活性的实验研究.docVIP

广西苦丁茶提取物体外抗单纯疱疹病毒1型活性的实验研究 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：广西苦丁茶提取物体外抗单纯疱疹病毒1型活性的实验研究 1 1 材料 3 2 方法 3 3 结果 4 4 讨论 5 文2：余甘子提取物体外抗单纯疱疹病毒1型和2型的初步研究临床医学 6 1 材料仪器 8 2 方法 9 3 结果 10 4 讨论 11 参考文摘引言： 12 原创性声明（模板） 13 文章致谢（模板） 14 正文 广西苦丁茶提取物体外抗单纯疱疹病毒1型活性的实验研究 文1：广西苦丁茶提取物体外抗单纯疱疹病毒1型活性的实验研究 Abstract：ObjectiveTo investigate the activities of anti- HSV-1 of crude extracts from Ilex Kudmcha . Tseng. MethodsCPE observation and plaque reduction assay were used to test the antiHSV1 effect of Ilex Kudmcha C. J. Tseng on cell level in three aspects:cell protection, HSV1 proliferation and synthesis effect on HSV1 infected study results in vitro showed that aqueous extract from Ilex Kudmcha C. J. Tseng could inhibit HSV-1 and its IC50 was μg/ml. Crude extract had antivirus activities in the drug protective action and the drug synthesis action on virus, however, it had no influence on virus proliferation. ConclusionAqueous extract from Ilex Kudmcha C. J. Tseng has anti-HSV-1 activity, and the activity happe in the stage of HSV-1 binding and adsorpting with Vero cell. Key words：Ilex Kudmcha C. J. Tseng; CPE; Plaque reduction assay 苦丁茶Ilex Kudmcha C. J. Tseng是我国南部及西南部民间传统的药用植物，是冬青科冬青属苦丁茶种常绿乔木，在我国民间应用 历史 悠久。明代医学家李时珍在《本草纲目》中记载其 “苦、平、无毒，南人取作茗，煮饮，止渴明目，消炎利便、通肠 ”。 现代 医学研究表明苦丁茶能双向调节机体代谢，增强人体免疫功能，明显降低高脂血症患者的血清总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白，具有清咽利喉、清热解毒、护肝解酒、消炎利便等功效；还对高血压病、高血脂、动脉硬化、糖尿病、肥胖症、结肠炎、便秘、痔疮和各类口腔炎症等有明显的防治作用；用其煮水外洗可杀菌、消炎，防治红眼病、粉刺、暗疮、痱子等多种疾患。 常年饮用可以保健身体、延年益寿，被誉为“长寿茶”、“美容茶”，是一种纯天然多功能保健珍品［1～4］。但是对其抗病毒功效的研究相对较少，本实验就由不同溶剂提取物得到的苦丁茶粗提物，以Vero细胞作为体外筛选细胞模型检测其对单纯疱疹病毒1型（Herpes simplex 1 virus，HSV-1）的抑制作用，为筛选新型抗病毒药物的研发提供思路和理论依据。 1 材料 无环鸟苷(ACV)购于湖北科益药业股份有限公司；单纯疱疹病毒1型（HSV-1）F株购自武汉大学病毒研究所；Vero细胞购于美国ATCC公司，由本室保存。Vero细胞用含10%胎生牛血清的DMEM培养基连续传代3次保持对数生长期供实验用。 实验样品由昆明植物所通过以下提取流程获得：收集广西苦丁茶样品（100g）→ 粉碎 → 醋酸乙酯提取 → 甲醇提取 → 热水提取 → 得到醋酸乙酯提取物（F1）和水提物（F3） 2 方法 病毒滴度测定将毒株作10倍系列稀释，常规方法感染单层Vero细胞，37℃，5％CO2培养3d，CPE法观察细胞病变情况，按Reed Muench［5］方法计算TCID50。 细胞毒性测定Vero细胞经胰酶消化后，以×105个/孔的密度加入96孔培养板中，待细