运动加中药对骨质疏松大鼠骨计量学的影响.docVIP

运动加中药对骨质疏松大鼠骨计量学的影响 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：运动加中药对骨质疏松大鼠骨计量学的影响 1 1 资料与方法 2 2 结 果 4 3 讨 论 5 文2：辛伐他汀对骨质疏松大鼠的防治作用 6 1 材料与方法 7 2 结 果 9 3 讨 论 10 参考文摘引言： 12 原创性声明（模板） 14 文章致谢（模板） 14 正文 运动加中药对骨质疏松大鼠骨计量学的影响 文1：运动加中药对骨质疏松大鼠骨计量学的影响 骨质疏松是一种多因多果全身性骨骼疾病，其发病机制目前也不完全清楚，虽然各种方法对骨质疏松的预防和治疗均有一定的干预作用，但从总体上看其疗效均较为局限。运动在骨质疏松的预防、治疗和康复过程中均可发挥积极明显的作用〔1〕。中药骨康具有补肾壮骨、健脾益气、活血通络的作用，是一个较理想的防治骨质疏松的药物〔2〕。本研究旨在探讨运动与中药联合作用对骨质疏松的作用及其机制。 1 资料与方法 药物及试剂 雌激素尼尔雌醇片(上海华联制药有限公司生产，批号：961001);盐酸四环素(上海华舜生物工程有限公司提供，批号：);钙黄绿素和过氧化苯甲酸(广州化学试剂厂提供，批号：2和2);Goldner′s染色剂(美国Sigma公司);甲基丙烯酸甲酯、邻苯二甲酸二丁酯(天津化学试剂一厂提供，批号分别为：040328和);硫酸铬钾为汕头光华化学厂产品，批号：991001;中性树胶由上海明胶厂生产，批号B。 主要仪器 硬组织切片机(德国Leica RM2155);慢速锯(美国Buehler LTD.);碳化钨钢刀(德国Leica)自动图像数字化分析仪(德国Leica); 计算 机( 中国 方正电脑公司);骨形态计量学测量软件(美国OsteoMetrics，Inc. 动物及分组 选用6月龄健康雌性SD大鼠67只，体重260～290 g，清洁级(由广州中医药大学实验动物中心提供，合格证号：2003A010)。随机分为6组，正常对照组(11只)、去卵巢手术组(12只)、雌激素对照组(12只)、运动组(11只)、中药组(11只)、运动+中药组(10只)。实验动物分笼饲养，自由进食标准饲料和饮用水。参照 文献 〔3〕制作去卵巢骨质疏松模型,用10%水合氯醛溶液按 ml/100 g腹腔注射麻醉，正常对照组大鼠行假手术，其余各组大鼠双侧卵巢完整切除，进行手术造模。手术后正常饲养3个月后开始治疗，治疗时间为3个月。正常对照组、去卵巢手术组和运动组以蒸馏水10 ml/kg灌胃，1次/d;雌激素对照组按体重1 mg/kg的标准给予浓度为 mg/ml的尼尔雌醇灌胃，1次/w，其余各天给予蒸馏水10 ml/kg灌胃;中药组和运动+中药组按 g/kg骨康(相当于临床剂量的10倍)，灌胃给药，每天1次;运动组和运动+中药组按要求给予跑步训练。本实验模拟田径运动中周期性耐力跑的形式，参照Bedford〔4〕的动物负荷标准，采用段氏PT98型鼠类跑台进行运动训练。训练大鼠的运动强度逐渐加大，2 w内达到设计负荷。开始跑速为12 m/min，持续20 min，坡度为0°，以后隔日增加运动强度3 m/min，增加运动时间10 min。2 w后达到跑速20～22 m/min，坡度为50，每天1 h，每周连续训练5 d，休息2 d。在动物处死前14和13 d，以及处死前第3天和第4天分别于背部皮下注射25 mg/kg盐酸四环素和5 mg/kg钙黄绿素进行双荧光标记，以测量骨组织动态参数。 骨标本制备 实验结束时，处死动物，取其第2腰椎椎体(L2)用低速锯切开暴露骨髓腔置于福尔马林缓冲液中固定24 h后,经乙醇脱水后行不脱钙骨包埋。包埋块用硬组织切片机分别切成4 μm的薄骨片和8 μm的厚骨片。薄片用Goldner染色，透明后封片，用于测量骨形态计量学的静态参数。厚片直接透明后封片，用于测量骨小梁变化的动态参数。 观察指标 测量和观察第2腰椎骨组织形态计量学静态和动态参数〔5〕。静态参数包括骨组织面积(, mm2)、骨小梁面积(, mm2)、骨小梁周长(, mm)、破骨细胞数量(,N)及其相应计算参数。计算参数为骨小梁面积百分数(, %)、骨小梁宽度(, μm)、骨小梁数目(,mm)、骨小梁分离度(, μm)、每毫米破骨细胞 数(, mm)、单位骨小梁面积破骨细胞数(,mm2);动态参数包括单荧光周长(, mm)、双荧光周长(, mm)、双荧光间距(, μm)及相应计算参数：荧光周长百分数(, %)、矿化沉积率(MAR, μm/d)、骨形成率(BFBS, μm/d×100; BFBV, %/年; BFTV,%/年) 统计学处理 所有数据以x±s表示，采用统