新生期注射谷氨酸单钠对老年雄性大鼠骨质疏松疗效的影响.docVIP

新生期注射谷氨酸单钠对老年雄性大鼠骨质疏松疗效的影响 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：新生期注射谷氨酸单钠对老年雄性大鼠骨质疏松疗效的影响 1 1 材料与方法 2 2 结 果 3 3 讨 论 3 文2：人参须水提液对D半乳糖致雄性大鼠骨质疏松骨量的影响 5 1 材料与方法 5 2 结果 7 3 讨论 7 参考文摘引言： 8 原创性声明（模板） 9 文章致谢（模板） 10 正文 新生期注射谷氨酸单钠对老年雄性大鼠骨质疏松疗效的影响 文1：新生期注射谷氨酸单钠对老年雄性大鼠骨质疏松疗效的影响 近年来国内外研究发现，瘦素通过中枢神经系统可以调控骨形成，其作用部位很可能在下丘脑〔1〕。已有 文献 报道，新生期大鼠注射左旋谷氨酸单钠(MSG)可选择性损毁下丘脑弓状核(ARC)神经元〔2，3〕。笔者曾经报道新生期注射MSG可导致大鼠骨质疏松〔4〕，下丘脑弓状核通过下丘脑生长激素胰岛素样生长因子I轴和下丘脑垂体性腺轴调控骨代谢和骨的生长发育〔5，6〕。本研究通过观察新生期注射MSG损毁下丘脑弓状核对老年雄性大鼠骨质疏松疗效的影响，进一步探讨ARC对骨代谢的调控，同时为男性骨质疏松的防治提供理论依据。 1 材料与方法 实验动物及分组 选用体重为～ g的新生期雄性SD大鼠(广东医学院实验动物中心提供)，采用同窝对照的方法，按体重随机分为新生期注射MSG对照组(MA)、新生期注射生理盐水对照组(NA)、注射MSG治疗组(MT)、注射生理盐水治疗组(NT)，每组6只，并用龙胆紫作好标记。注射MSG组大鼠在出生后第1、3、5、7、9天颈部皮下注射10% MSG(上海化学试剂公司，4 g/kg体重)共5次;注射生理盐水组同法皮下注射等体积的生理盐水。 动物饲养及处理 24 d断奶，在完全相同的条件下饲养至700 d龄时，MA组与NA组大鼠给予生理盐水，按每天 ml/100 g灌胃，MT组和NT组大鼠每天给予甲基睾丸素(12 μg/100 g)和碳酸钙( g/100 g)，所有药物均配成混悬液，按每天 ml/100 g灌胃，120 d后处死取材，取血清、脑、右侧胫骨，放入10%的福尔马林液中固定。 检测指标及方法 取下丘脑作石蜡冠状切片，厚度为4 μm，HE染色后光镜下(40×10)观察，在弓状核正中隆起层面圈定同一范围，利用LEICA Qwin图像分析软件 计算 ARC神经细胞数。采用放免分析法测定血清雌二醇(E2)、睾酮(T)的水平(放免试剂盒购自天津九鼎医学生物工程公司)。取右侧胫骨上1/3段经脱钙、脱水、透明、石蜡包埋，矢状面连续切片，厚度为5 μm，行胶原纤维特殊染色后采用半自动图像数字化分析仪测定骨小梁面积、骨小梁数量、骨小梁厚度和骨小梁分离度，将上1/3段胫骨的HE染色片在高倍视野下(40×10)进行破骨细胞记数。 统计学处理 测量数据使用统计软件进行统计学处理，先行方差齐性检验，方差齐者使用t检验，方差不齐的经变量转换后使用t检验或直接使用非参数检验。 2 结 果 老年大鼠ARC细胞计数 NA组±，MA组±，MT组±，NT组±。与NA组比较，MA组大鼠ARC区域内神经细胞数明显减少，差异有非常显著性意义(P)，损毁程度达70%～80%，见图1。 老年大鼠胫骨干骺端松质骨的变化 见表1，MA组大鼠胫骨干骺端松质骨的%、、显著低于NA组(P,P)，而显著高于NA组(P)。治疗后MT组大鼠的%、、显著高于MA组(P),而显著低于MA组(P)。光镜下观察见图2，与MA组比较，MT组大鼠骨小梁数量增加、明显变厚。治疗后NT组大鼠的%、显著高于NA组(P),而显著低于NA组(P) 老年雄性大鼠血清中性激素水平的改变 见表1。MA组大鼠血清中T、E2的水平明显低于NA组(P)。治疗后MT组大鼠血清中T、E2的水平明显升高，与MA组相比，差异有显著性意义(P)。治疗后NT组大鼠血清中T、E2的水平明显升高，与NA组相比，差异有显著性意义(P)。表1 治疗前后各组大鼠胫骨干骺端骨组织形态计量学参数及性激素水平的比较 3 讨 论 MSG是一种神经毒素，能选择性地破坏新生期大鼠、小鼠等动物下丘脑弓状核神经胞体，而对路过或终止于弓状核的神经纤维无明显影响。许多研究表明，通过外周给予新生大鼠MSG可作为损毁下丘脑弓状核的动物模型〔7，8〕 近年来研究发现，衰老时弓状核内神经元的数量和形态均发生显著变化。Mille等发现老年小鼠(18～20月龄)弓状核内神经元的数量减少了31%，核周体的总面积减少10%，而细胞核的总面积却增加。Sartin等〔9〕研究了衰老时大鼠下丘脑神经元数量的变化，发现弓状核内神经元的数量减少最明显。弓状核神经