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沙苑子中沙苑子苷A对照品的制备及鉴定 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：沙苑子中沙苑子苷A对照品的制备及鉴定 1 1 仪器与材料 2 2 方法与结果 3 3 讨论 5 文2：延胡索中去氢紫堇碱对照品的制备及含量测定 5 1 仪器与试剂 5 2 方法与结果 6 3 讨论 9 参考文摘引言： 9 原创性声明（模板） 10 文章致谢（模板） 11 正文 沙苑子中沙苑子苷A对照品的制备及鉴定 文1：沙苑子中沙苑子苷A对照品的制备及鉴定 沙苑子为豆科植物扁茎黄芪Astragalus complanatus .干燥成熟的种子［1］，能温补肝肾、固精、缩尿、明目，用于 治疗 肾虚腰痛，遗精早泄，白浊带下，小便余沥，眩晕目昏；始载于《图经本草》，名为白蒺藜。 沙苑子主要含有黄酮类、三萜类、有机酸类、氨基酸等。黄酮类成分是沙苑子的主要有效成分，具有许多药理活性。近年来研究认为沙苑子总黄酮可保护大鼠重要器官免受运动损伤，明显提高大鼠的运动能力［2］，抑制肝纤维化形成［3］，抗肿瘤［4～6］，此外对SHR和RHR［7～8］有明显的降压作用。但有关沙苑子的质量标准中，由于缺少化学对照品，尚无沙苑子黄酮含量控制指标，2005年版的《 中国 药典》中沙苑子的质量标准也仅有性状、显微、荧光检测等内容。为了进一步研究和完善沙苑子的质量标准，迫切需要研制一种或多种对照品。沙苑子苷A是沙苑子黄酮的主要特征性成分，且在沙苑子中的含量较高，也是沙苑子保肝抗肝纤维化的主要有效成分之一。本文从沙苑子中提取、分离和纯化沙苑子苷A，制备沙苑子苷A对照品，为制定和完善沙苑子及其制剂的质量标准提供沙苑子苷A对照品。 1 仪器与材料 美国Nicolet公司FT-IR Magna-550红外光谱仪 (Kbr压片)；美国VARIAN公司INVOA-400超导核磁共振谱仪核磁共振仪；美国ABI Qtrap2000液相色谱－质谱仪；英国MICROMASS GCT OA-TOF高分辨质谱仪；惠普7530-GUV/VIS紫外光谱仪；岛津LC-20A高效液相色谱议，SPD-M20A二极管阵列检测器，岛津 SP1色谱工作站；WC-1，显微熔点测定仪。 沙苑子A complatus .苏州雷允上药业集团公司提供, 产地为陕西渭南，由苏州大学刘春宇教授鉴定为豆科植物扁茎黄芪Astragalus complanatus .的种子；黄酮吸附树脂ZTC-5型（天津正天澄清技术有限公司）；聚酰胺（100-200目，浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂）；聚酰胺薄膜（浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂）；硅胶（青岛海洋化工厂），其它化学试剂均为分析纯。 2 方法与结果 沙苑子苷A的制备工艺取沙苑子粗粉3 kg，用10倍量石油醚回流脱脂，脱脂药粉挥干，用10倍量的80%乙醇提取2次， h/次,过滤，合并滤液，回收溶剂后，加水稀释至3 000 ml，通过ZTC-5黄酮大孔吸附树脂，依次用水及50%乙醇洗脱，收集50％乙醇洗脱部位，回收溶剂，干燥，即为沙苑子总黄酮（40 g）。取总黄酮加水溶解，过滤，经聚酰胺柱层析，用水及不同浓度乙醇梯度洗脱，收集水洗脱部位，上硅胶柱，用醋酸乙酯∶甲醇梯度洗脱，醋酸乙酯∶甲醇(10∶2)洗脱部位析出沙苑子苷A结晶，甲醇进行多次重结晶，得淡黄色针状结晶（700 mg） 对照品的理化性质及结构鉴定结晶经显微熔点测定仪测定，mp279～280℃（未校正），盐酸－镁粉反应呈樱红色；酸水解后溶液遇斐林试剂呈阳性反应，三氯化铝反应呈黄色；氧氯化锆－枸缘酸反应鲜黄色消退，说明有5位羟基无3位游离羟基。提示为黄酮苷类化合物。光谱分析结果如下：UV（nm）MeoH：，；IRKbrMAX 3 （γOH），1 （γC＝O），1 ，1 （Ar）：1 (Ar-O-C),1 ,1 022(C-O)；EI-MS m/e :(苷元)300（M－162＋H），271，121；Mariner Mass (m/2) (M＋624+1);(M＋-162+H);;说明该化合物含两个六碳糖。13C-NMR: （见表1）。1H-NMR:(1H,s,5-OH), (2H,d,J=9 Hz,2′,6′-H,(2H, d,J=9 Hz, 3′,5′-H),(1H,d,J=1 Hz,8-H),(1H,d,J=1 Hz,6-H),(1H, d, J=7 Hz, glc1″-H),(1H,d,J=7 Hz,glc1″′ -H),(3H, s,7-OCH3)。根据以上数据分析，与 文献 ［2］报道的沙苑子苷A一致。见表1及图1～3。表1 沙苑子苷AC-NMR数据（略） 对照品的纯度检测 对照品的杂质检查 薄层色谱法检查：取适量沙苑子苷A对