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工业微生物产生菌的分离筛选99 工业微生物产生菌的分离筛选99 工业微生物产生菌的分离筛选99 工业微生物产生菌地分别挑选 菌株分别 separation ）就是将一个混淆着各样微生物地样品经过分别技术划分开 ,并依据实质要乞降菌株地特征采纳快速、正确、有效地方法对他们进行分别、 挑选 , 从而获取所需微生物地过程 . 菌株分别、挑选 screening ）虽为两个环节 , 但却不可以绝然 分开 , 因为分别中地一些举措自己就拥有挑选作用 . 工业微生物产生菌地挑选一般包含两大部 分：一是从自然界分别所需要地菌株 , 二是把分别到地野生型菌株进一步纯化并进行代谢产物鉴 别 . 在实验工作中 , 为使挑选达到事半功倍地成效 , 总地说来可从以下几个门路进行采集和挑选： 1 ）向菌种收藏机构讨取有关地菌株 , 从中挑选所需菌株 .2 ）由自然界采集样品 , 如土壤、 水、动植物体等 , 从中进行分别挑选 .3 ）从一些发酵制品中分别目地菌株 , 如从酱油中分别蛋 白酶产生菌 , 从酒醪中分别淀粉酶或糖化酶地产生菌等 . 该类发酵制品经过长久地自然选择 , 拥有 悠长地历史 , 从这些传统产品中简单挑选到理想地菌株 . 菌株地分别和挑选一般可分为采样、富 集、分别、产物鉴识几个步骤 . 第一节 含微生物样品地采集自然界含菌样品极其丰富 ,土壤、 水、空气、枯枝烂叶、植物病株、烂水果等都含有众多微生物 , 种类数目十分可观 . 但整体来讲 土壤样品地含菌量最多 . 一、从土壤中采样土壤因为具备了微生物所需地营养、空气和水分 , 是 微生物最集中地地方 . 从土壤中几乎能够分别就任何所需地菌株 , 空气、水中地微生物也都根源 于土壤 ,所以土壤样品常常是首选地采集目标 . 一般状况下 , 土壤中含细菌数目最多 ,且每克土壤地 含菌量 大概 犹如 下 地 递 减规律 ：细 菌 108 ） 放线菌107 ） 霉菌 106 ） 酵母菌 105 ） 藻类 104 ） 原生动物 103 ） , 此中放线菌和霉菌指其孢子数 . 但各样微生物因为 生理特征不同 , 在土壤中地散布也跟着地理条件、养分、水分、土质、季节而有很大地变化 . 因 此 , 在分别菌株前要依据分别挑选地目地 , 到相应地环境和地域去采集样品 . 一）依据土壤特色 1 ．土壤有机质含量和通气状况一般耕种土、菜园土和近郊土壤中有机质含量丰富 ,营养充分 ,且 土壤成团粒构造 , 通气饱水性能好 ,因此 ,微生物生长旺盛 , 数目多 , 特别合适于细菌、放线菌生长. 山坡上地丛林土 , 植被厚 , 枯枝落叶多 ,有机质丰富 ,且灰暗湿润 , 合适霉菌、酵母菌生长生殖 , 微生 物数目相应也比较少 . 从土层地纵剖面看 ,1 ～ 5cm 地表层土因为阳光照耀 ,蒸发量大 , 水分少 , 且 有紫外线地杀菌作用 , 因此微生物数目比 5 ～ 25cm 土层少； 25cm 以下土层则因土质密切 , 空 肚量不足 , 养分与水分缺乏 ,含菌量也逐渐减少 . 所以 , 采土样最好地土层是 5 ～ 25cm. 一般每克土 中含菌数约几十万到几十亿个 , 并且各样种类地细菌和放线菌几乎都能分别到 . 如好气芽孢杆 菌、假单胞菌、短杆菌、大肠杆菌、某些嫌气菌等 . 但总地说来酵母菌散布土层最浅 , 约 5 ～ 10cm, 霉菌和气氧芽孢杆菌也散布在浅土层 .2. 土壤酸碱度和植被状况土壤酸碱度会影响微生物 种类地散布 . 偏碱地土壤 pH7.0 ～ ）环境 , 合适于细菌、放线菌生长 . 反之在偏酸地土壤 以下）环境下 ,霉菌、酵母菌生长旺盛 . 因为植物根部地分泌物有所不同 , 所以 ,植被对 微生物散布也有必定地影响 . 如番茄地或腐化番茄聚积处有许多维生素 C 生产菌 .葡萄或其余果 树在果实成熟时 ,其根部邻近土壤中酵母菌数目增加 .豆科植物地植被下 , 根瘤菌数目比其余植被 下占优势 .3 ．地理条件南方土壤比北方土壤中地微生物数目和种类都要多 , 特别是热带和亚热带 地域地土壤 .很多工业微生物菌种 , 如抗生素产生菌 ,特别是霉菌、酵母菌 , 大多从南方土壤中挑选 出来 . 原由是南方温度高 ,暖和季节长 , 雨水多 , 相对湿度高 ,植物种类多 , 植被覆盖面大 , 土壤有机 质丰富 , 造成得天独厚地微生物生长环境 .4 ．季节条件不同季节微生物数目有显然地变化 , 冬天 温度低 ,天气干燥 , 微生物生长迟缓 , 数目最少 . 到了春季跟着气温地高升 , 微生物生长旺盛 ,数目逐 渐增添 . 但就南方来说 , 春季常常雨水多 , 土壤含水量高 , 通气不良 ,即便有微生物所需地温度、湿 度, 也不