基因工程操作.ppt

基因工程操作;;一、目 基因 获取;1、从基因文库中获取目 基因;;原核细胞 基因结构;;;1．下列相关基因结构 认识中, 正确 是 （ ） A．大豆基因中内含子是能够编码蛋白质 序列 B．乳酸菌与酵母菌基因结构中都存在外显子和内含子 C．大肠杆菌基因与RNA聚合酶结合位点位于编码区 下游 D．水稻细胞基因 编码区中存在非编码序列 2．（多选）原核细胞与真核细胞基因结构 共同特点是 （ ） A．编码区都有能编码蛋白质 序列 B．编码区都是连续 C．非编码区都能调控遗传信息 表示 D．非编码区都有RNA聚合酶结合 位点;提取某种生物 全部DNA;提取某种生物 某器官或特定发育时期 mRNA;mRNA; 真核生物 基因用逆转录法得到 cDNA与原基因相同吗？有哪些差异？原核生物基因呢？;;;基因组DNA文库;基因组DNA文库与cDNA文库 比较;（3）构建基因文库 目 ;依据: 目 基因 相关信息。 如: 依据基因 核苷酸序列 基因 功效 基因在染色体上 位置 基因 转录产物mRNA 基因翻译产物蛋白质等特征;构建基因组DNA文库时, 首先应分离细胞 A、染色体DNA?? B、线粒体DNA C、总mRNA?? D、tRNA ;2、利用PCR技术扩增目 基因;PCR技术;过程: ;③过程: ;;蛋白质 氨基酸序列;一、目 基因 获取;1、基因表示载体 作用;（1）用一定 _________切割质粒, 使其出现一个切口, 露出____________。 （2）用___________切断目 基因, 使其产生_____ ____________。;质粒;Hin d限制酶;选择带两个标识基因 质粒有什么目 ？;2.基因表示载体 组成: ;①载体与表示载体 区分: 二者都有标识基因和复制原点两部分DNA片段。表示载体在载体基础上增加了目 基因、开启子、终止子三部分结构。 ②开启子、终止子: 对于目 基因表示必不可少。 ③目 基因不能单独进入受体细胞, 必需以表示载体 方法携带进去。 ④基因表示载体 构建不可能是千篇一律 ;常见 受体细胞: ;1、将目 基因导入植物细胞;（2）基因枪法;（2）基因枪法——微弹轰击法;胚珠;（3）花粉管通道法;2、将目 基因导入动物细胞;3、将目 基因导入微生物细胞;小结: 将目 基因导入受体细??;;（一）、检测（分子水平）;;（二）、判定（个体生物学水平）;小结: 目 基因 检测与判定;2、下列属于获取目 基因 方法 是( ) ①利用mRNA反转录形成 ②从基因组文库中提取 ③从受体细胞中提取 ④利用PCR技术 ⑤利用DNA转录 ⑥人工合成 A.①②③⑤ B.①②⑤⑥ C.①②③④ D.①②④⑥;3、 在基因工程中, 把选出 一个目 基因（共1000个脱氧核苷酸对, 其中腺嘌岭脱氧核苷酸是460个）放入DNA扩增仪中扩增4次, 那么, 在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸 个数是（ ）个;加热至95摄氏度 目 是使DNA中 断裂, 这一过程在细胞内是经过 解旋酶 作用来完成 。 当温度降低时, 引物与模板末端结合, 在DNA聚合酶 作用下, 引物沿模板延伸, 最终合成2个DNA分子, 此过程中 原料 , 遵照 标准是 。 Taq酶 特点是（ ） A.耐强酸 B.耐强碱 C.耐高温 D.最适温度37摄氏度 4.请指出PCR技术与DNA复制过程 区分 ;在遗传工程中, 若有一个控制有利性状 DNA分子片段为ATGTG／TACAC, 要使其数量增多, 可用PCR技术进行人工复制, 复制时应给予 条件是 ①双链DNA分子为模板 ②ATGTG或TACAC模板链 ③四种脱氧核苷酸 ④四种核苷酸 ⑤DNA聚合酶 ⑥热稳定DNA聚合酶⑦引物 ⑧温度改变 ⑨恒温 A．①③④⑦⑧⑨ B．①②④⑥⑦⑧ C．①②⑤⑥⑦ D．①③⑥⑦⑧;在已知序列信息 情况下, 获取目 基因 最方便方法是 A、化学合成法? ? B、基因组文库法 C、cDNA文库法??