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392 2016 年CSCO 学术年会 汇编 目的：肾癌转移预后较差，长链非编码 RNA(LncRNA)在肾癌转移中的作用尚不明确。 课题组前期研究发现一个新的LncRNA-SARCC 在肾癌组织中低表达并和患者预后呈正相关。 沉默LncRNA-SARCC 促进肾癌细胞的迁移和侵袭，过表达LncRNA-SARCC 抑制肾癌细胞 的迁移和侵袭。分子机制方面发现 LncRNA-SARCC 能直接结合并泛素化雄激素受体 (Androgen Receptor ，AR) 。因此我们认为：LncRNA-SARCC 通过调控AR 影响肾细胞癌侵 袭和转移。这项研究为肾癌的治疗提供新的理论基础。 ：荧光原位杂交(FISH)和质核分 离实验明确 LncRNA-SARCC 细胞定位；RNA 免疫共沉淀(RNA-IP)发现和 AR 结合的 LncRNA-SARCC；RNA-pull down 和缺失作图实验进一步验证LncRNA-SARCC 结合的蛋白 为AR ，并发现LncRNA-SARCC 的结合区域。划痕和Transwell 侵袭实验检测LncRNA- SARCC 对肾癌细胞株的生物学行为影响。 鼠肾癌原位移植瘤模型和 IVIS 检测 LncRNA-SARCC 对肾癌细胞的生物学行为。临床水平了解LncRNA-SARCC 和肾癌病理分 级分期以及预后相关性。结果：1.LncRNA-SARCC 定位于细胞质中；2.过表达LncRNA- SARCC 能抑制肾癌细胞的迁移和侵袭，沉默LncRNA-SARCC 能促进肾癌细胞的迁移和侵 袭；3.RNA-IP ，RNA-pull down 和缺失作图实验发现LncRNA-SARCC 和AR 直接结合并且 结合区域为3’的800nt 区间；4.LncRNA-SARCC 转录后抑制AR 蛋白并抑制其蛋白 性； 5.LncRNA-SARCC 通过泛素化方式降解AR 蛋白；6.LncRNA-SARCC 和肾癌患者的肿瘤大 小，分期和分级相关(P0.05) ，和肾癌患者的预后呈正相关性，表达高者预后好，表达低者 预后差。结论：LncRNA-SARCC 作为一个抑癌基因和肾癌预后正相关，将来有可能成为肾 癌临床 标志物。 ：肾细胞癌 长链非编码RNA 转移   COPS3 与RAF1 相互作用激活MAPK-ERK 促进骨肉瘤肺转移 张 帆 人民医院骨肿瘤科 目的：体外实验筛选COPS3 蛋白的相互作用蛋白，进一步明确其促进肺转移机制。方 法：SCID 小鼠随机分为两组，尾静脉分别注射对照组(shCTRL-143B)细胞与实验组 (shCOPS3-143B)细胞，4 对比两组肺转移结节数。免疫共沉淀筛选COPS3 的相互作用 蛋白，并采用Western Blot 验证。在高侵袭力的143B 细胞中，采用transwell 的 对比干 扰COPS3 基因，MAPK-ERK 通路抑制剂，以及两者联合对其侵袭迁移能力的影响；在低侵 袭力的Saos-2 细胞中，采用transwell 的 对比过表达COPS3 基因，以及过表达COPS3 基因并使用 MAPK-ERK 通路抑制剂对其侵袭迁移能力的影响。并均采用 Western Blot 对 MAPK-ERK 通路进行检测。结果：与对照组相比，注射干扰COPS3 基因的143B 细胞组小 鼠骨肉瘤肺转移结节数明显减少；免疫共沉淀证实 COPS3 与MAPK-ERK 通路成员 RAF1 相互作用；干扰COPS3 基因或使用MAPK-ERK 通路抑制剂均能抑制该通路并抑制143B 细胞的侵袭迁移能力，且两者有协同作用。过表达COPS3 基因可以激活MAPK-ERK 通路 并促进Saos-2 细胞的侵袭迁移，而MAPK-ERK 抑制剂可以逆转过表达COPS3 所引起的侵 2016 年CSCO 学术年会 汇编