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青蒿素类抗疟药作用机理研究述评 青蒿素类抗疟药作用机理研究述评 作者:叶祖光李思迪 来源:《中国中医药信息》2014年第09期 摘要: 本文综述了自1972年青蒿素问世以来,研究者们在青蒿素类抗疟药的作用机理方面所做的研究工作,包括采用电子显微镜技术的超微结构病理学研究、采用生化药理学方法研究青蒿素对疟原虫代谢和疟色素凝集的影响,并对氧化损伤及铁离子作用机理的国内外研究情况进行了梗概的讨论。 关键词:青蒿素;疟疾;抗疟药;作用机理;述评 DOI:10.3969/j.issn.1005-5304.2014.09.002 中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1005-5304(2014)09-0005-05 青蒿素类化合物是一化学结构新颖的新型抗疟药,是分子中含有一个过氧桥的倍半萜化合物。由于结构独特,所以它的抗疟作用机理也与已知抗疟药迥然不同。 1 青蒿素类化合物对疟原虫超微结构的作用 自20世纪70年代发现青蒿素的抗疟活性之后,学者们除了对青蒿素类化合物的药效学作用进行了深入广泛的研究之外,还对其抗疟作用机理开展了初步的研究。如采用电子显微镜技术观察了青蒿素对伯氏鼠疟原虫超微结构的影响,小鼠口服给药青蒿素剂量为100 mg/kg和800 mg/kg时,青蒿素主要作用于疟原虫的膜系结构,如质膜、食物泡膜、线粒体膜、核膜。其损伤表现为双层膜增宽、成泡状、出现螺纹膜等;内质网呈线状排列,或呈空泡状,或出现瓦解,也见到自噬泡的产生;核膜肿胀,核染色质集聚[1]。1976年和1977年美国学者成功地建立了人体恶性疟连续体外培养方法[2-3],供他人进行相应的研究工作。 基金项目:科技部重大专项-重大新药创制(2012Z 005);中国中医科学院基本科研业务费自主选题重点项目(ZZ0608) 叶氏等[4]采用电子显微镜技术,在观察体外培养人恶性疟原虫正常超微结构的基础上, 进一步比较研究了青蒿素和氯喹对疟原虫超微结构的影响[5-6]:疟原虫在青蒿素体外抗疟有效浓度为10-7 mol/L和5×10-7 mol/L作用2 h,其形态学就发生了病理变化,包括细胞膜、线粒体膜及核膜的膜间隙增宽,内质网的肿胀及膜变形等,同时观察到自噬泡的形成,但自噬泡中并未含有富铁的色素团块,而氯喹在作用30 min时便出现大量的自噬泡,而且其中含有大量 的色素团块,这是青蒿素和氯喹对疟原虫超微结构影响的最大不同。江氏[7-8]在美国Aikawa 领导的实验室用线粒体结构较为明显的P.inui猴疟及体外培养的恶性疟进行电镜观察,进一步证实了青蒿素主要作用于疟原虫的线粒体。此外,张氏等[9]用3H-青蒿素作用于体外培养人体恶性疟原虫,然后进行了放射电镜自显影的观察,结果显示高电子密度扭曲状细丝的银颗粒出 现在疟原虫感染的红细胞中，其中 2/3 出现在疟原虫内。疟原虫内银颗粒的分布为：质膜 41%，食物泡膜 13%，泡内 2%。色素颗粒小，银颗粒所在的疟原虫部位和上述受损的细胞结 构是一致的。这提示由于青蒿素分布在疟原虫的一些膜结构中，故造成了疟原虫的膜系统发生 病理变化。青蒿素衍生物如蒿甲醚和青蒿琥酯对疟原虫超微结构的作用特点基本上同于其母体 药物青蒿素[10]。 除了上述在透射电镜下观察到形态学变化，叶氏等[11]还采用扫描电镜技术，观察了感染 伯氏鼠疟的红细胞表面结构以及青蒿素的作用。镜下发现，感染疟原虫的红细胞内凹明显加 深，甚至形成较深的腔窝或者弹孔样的“坑洼”区，这是由于疟原虫代谢旺盛而与血浆进行大量 的物质交换所致。上述红细胞表面结构的变化称之为“代谢窗”（metabolic window）。青蒿素 对感染红细胞上的代谢窗的结构和数量没有明显影响，这说明青蒿素并非通过损害代谢窗而杀 伤疟原虫，同时也说明青蒿素选择性地作用于疟原虫而对宿主细胞并没有明显的影响。 电子显微镜的方法可以对疟原虫细胞器或超微结构进行直接观察，能够观察到药物对虫体 内细胞器的损伤及程度，从而为进一步研究其作用原理提供线索和方向。在上述基础上，赵氏 等[12-13]认为疟原虫膜系结构含有细胞色素氧化酶，他们采用鼠疟模型研究蒿酯钠对细胞色素 氧化酶的影响，结果表明蒿酯钠可以完全抑制膜系结构内细胞色素氧化酶的活性。李氏等[14] 认为，青蒿素类药物能够抑制细胞色素氧化酶、干扰膜系统的线粒体功能、妨害虫体消化酶分 解宿主血红蛋白成为氨基酸，致使疟原虫无法获得足够的营养和蛋白合成原料而形成自噬泡， 导致其崩解而死亡。然而，笔者采用酵母菌和大鼠线粒体分别观察青蒿素对线粒体氧化磷酸化 反应的影响，其结果均是阴性（未发表）。总之，青蒿素类抗疟药可以引起疟原虫膜系统形态 学上的病理变化是肯定的，然而，一般而言，在形态学改变之前，疟原虫的酶学及其生化