沙门氏菌检验详细流程.pptVIP

GB 4789.4-2010食品安全国家标准食品微生物学检验 沙门氏菌检验 沙门菌概况 沙门菌是1885年由Salmon氏等在猪霍乱流行时，分离出的猪霍乱沙门菌，由于Salmon氏对本属细菌的发现贡献卓越，故定名为沙门菌属。 沙门菌属是肠杆菌科中最重要的病原菌。它是一群抗原结构、生化特性相似的革兰氏阴性杆菌。血清型繁多，目前已发现的沙氏菌有2500多个血清型和变种。我国发现的有250多个血清型。 沙门菌的分类 根据生化反应不同，分为2个种： 肠道沙门菌（Samonella enterica） ： Ⅰ 肠道亚种（subsp. enterica ） Ⅱ 萨拉姆亚种 （subsp. salamae ） Ⅲ 亚利桑那亚种（subsp. arizonae ） Ⅳ 豪顿亚种（subsp. houtenae ） Ⅵ 因迪卡亚种 （subsp. indica ） 邦戈尔沙门菌（Samonella bongori） Ⅴ 沙门菌种和亚种的鉴别 项目 肠道沙门菌 邦戈尔沙门菌 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅵ Ⅴ 卫矛醇 ＋ ＋ － － － ＋ 山梨醇 ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ 水杨苷 － － － ＋ － － ONPG － － ＋ － － ＋ 丙二酸盐 － ＋ ＋ － － － KCN － － － ＋ － ＋ 注：+为阳性 - 为阴性 沙门氏菌的血清分型 迄今为止沙门氏菌有 57个O抗原 116个H抗原 Vi抗原 被分成2500多个血清型。 Vi抗原 O抗原 H抗原 沙门氏菌命名与书写方式 目前的命名方法规定： 肠道沙门菌肠道亚种（亚种Ⅰ）给予专用名，并采用标本分离地址的地名。菌名的第一个字母需大写，且亚种Ⅰ的所用菌名不能用斜体。例如：肠道沙门菌鼠伤寒血清型应书写为Salmonella enterica subsp.enterica serotype Typhimurium，但在实际工作中，可简写为S. Typhimurium。 其他沙门氏菌均不给专用名，只在亚种数字名后直接书写抗原式，比如S.Ⅴ 66:z35:- 新的血清型名称的批准必须有巴斯德研究所、德国汉堡卫生研究所及美国CDC 3个实验室的一致同意。 沙门氏菌检验程序 1、我们的市场行为主要的导向因素，第一个是市场需求的导向，第二个是技术进步的导向，第三大导向是竞争对手的行为导向。 2、市场销售中最重要的字就是“问”。 3、现今，每个人都在谈论着创意，坦白讲，我害怕我们会假创意之名犯下一切过失。 4、在购买时，你可以用任何语言；但在销售时，你必须使用购买者的语言。 5、市场营销观念：目标市场，顾客需求，协调市场营销，通过满足消费者需求来创造利润。**** 6、我就像一个厨师，喜欢品尝食物。如果不好吃，我就不要它。***** 7、我总是站在顾客的角度看待即将推出的产品或服务，因为我就是顾客。*** 8、利人为利已的根基，市场营销上老是为自己着想，而不顾及到他人，他人也不会顾及你。**** 目的：修复损伤的细菌细胞； 方法：25 g（mL）样品＋225 mL BPW的无菌均质杯中，以8 000 r/min～10 000 r/min均质1 min～2 min，或置于盛有225 mL BPW的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min。若样品为液态， 不需要均质，振荡混匀。 如使用均质袋，可直接 进行培养。于36 ℃±1 ℃ 培养8 h～18h。 前增菌 无菌均质袋 轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1 mL, 转种于10 mL TTB 内, 于42 ±1 ℃培养18 ～24 h。同时, 另取1 mL, 转种于10 mL SC内, 于36 ±1 ℃培养18 ～24 h。 分别用接种环取增菌液1环, 划线接种于一个BS琼脂平板和一个XLD琼脂平板（或HE琼脂平板或显色培养基平板）。于36 ±1 ℃分别培养18 ～24 h (XLD琼脂平板、HE琼脂平板、显色培养基平板) 或40 h～48 h (BS琼脂平板)，观察各个平板上生长的菌落。 为了最大可能的检出沙门氏菌，原则上必须使用两种以上选择性分离培养基。 选择性增菌与分离 分离培养基回收率测定（%） 进口-SS 65.3 进口-SS 81.0 国产-SS 52.0 进口-HE 83.2 国产-HE 80.0 进口-XLD 83.0 国产-XLD 86.2 进口-BS 106.6 国产-BS 77.7 CHRO显色 68.4 国产-DHL 98.4 国产-WS 71.6 TSA（对照） 100.0 典型菌落--BS 菌落为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色, 菌落周围培养基可呈黑色或棕色；