野菊嫩茎的组织培养二.docxVIP

【Word版本下载可任意编辑】 PAGE 1 - / NUMPAGES 1 野菊嫩茎的组织培养二 试验方法 2.1野菊嫩茎的选择 试验材料在20**年10月29日上午10:00采取。选生长健壮无病虫害的野菊植株，从新分生的枝条上剪取幼嫩带尖茎部15cm左右，作为外植体使用。 2.2野菊嫩茎的处理 将剪取的嫩茎带回实验室，将茎上的叶片连带叶柄一同剪掉，但叶柄基部留下5mm以保护侧芽，防止侧芽在灭菌过程中受损。将去掉叶柄的嫩茎剪成长约2cm左右的小段。放在脸盆中用流水冲洗约5min，再用稀释的洗洁精漂洗约10min，最后用流水洗净，放人灭过菌的三角瓶中以待灭菌。灭菌时，将75％的酒精倒人盛有嫩茎小段的三角瓶，接着倒出开展表面灭菌，而后用0.1％的升汞溶液灭菌3min，最后用无菌水冲洗3一4次，在超净工作台上将其接种于培养基上。 2.3培养基的选择 由于野菊花同观赏菊花同科同属，据资料介绍，用于菊花培养的培养基有：MS、White、N6、B5等，一般采用MS为基本培养基，添加各种激素开展培养图。诱导培养基为：MS十BA1mg/L+NAA0.lmg/L,pH为5.8左右，培养的温度范围是24一26℃，光照强度是1500一300Olx，每天照光约12h。继代培养基为MS或MS+BA0.2mg/L十NAA0.5mg/L的培养基上。生根培养基为1/2MS十NAA0.1